京尼平对去细胞化猪肝脏组织材料免疫原性影响的研究

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1、中图分类号：0819隹科必謦SICHUANMEDICALUNIVERSITY硕士学位论文京尼平对去细胞化猪肝脏组织材料免疫原性影响的研究院（系)、所临床医学院研究生姓名吴秀娟学科、专业外科学■s?*V.*•，W»、'广•、、导师姓名谢明均教授二〇—五年四月四川医科大学毕业硕士研究生学位论文独创性声明及发表承诺书本人声明所呈交的学位论文（已整理成发表形式）是我个人在四川医科大学导_指导下，由导师及四川医科大学提供一切科研条件的情况下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构己经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已

2、在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在即将毕业离校之际，本人郑重承诺：该论文将以四川医科大学的名义发表（论文作者为研究生及导师，作者所在单位为四川医科大学），并在发表后立即将发表论文原件（期刊）寄与导师1册。学位论文作者签名:私4导师签名：日期：％/：r年Jt月0日日期：和/JT年_r月¥日四川医科大学硕士学位论文版权使用授权书本人完全了解四川医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：四川医科大学有权保留并向有关部门或机构送交本人学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，允许有关部门或机构以电子出版物形式出版发行，并对外进行全文内容服务。本人授权四川医科大学可以将本人学位论文的全部

3、或部分内容编入有关数据库进行检索，进行数字化处理汇编、通过网络或其它途径进行交流传播，可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印、扫描或其他复制手段保存和汇编学位论文，即四川医科大学具有本人学位论文的数字化制品复制权、信息网络传播权和汇编权。同时授权将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《万方数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。保密□，在_____________年解密后适用本授权书。本人提交的学位论文属不保密□(请在以上方框内I了）学位论文作者签名：导师签名：曰期:年JT月；^导师签章：地址及邮政编码：^日期：年日联系电话：联系电话:电子信箱：目录1京尼平对去

4、细胞化猪肝脏组织免疫原性影响的研究⋯⋯⋯⋯⋯11.1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11.2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41.3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101.5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181.6讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯321.7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯381.8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯391.9英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯472致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯483京尼平对去细胞化生物支架材料修饰的研究进展(综述)⋯⋯49四川医科大学硕士学位论文京尼平对去细胞化猪肝脏组织材料免疫原性影响的研究摘要目的：制备具有低免疫原性的去细胞化猪肝脏组织材料，探讨经交联剂京尼平修饰的去细胞化猪肝脏组织材料的免疫原性，为进一步利用去细胞化肝脏生物支架材料重建肝脏器官并实现临床异体移植奠定实验基础。方法：①去细胞化猪肝脏组织材料的制备及其修饰：1).随机选取体重为12-15kg雄性巴马小型猪4只，将其深度麻醉，取其完整肝脏，并随机选取其中3个肝脏，经门静脉插管后，以1%SDS+1%TritonX-

6、100方案灌注对完整猪肝脏进行去细胞化处理，制成去细胞化的猪肝脏生物组织材料；另一只未经去细胞化的猪肝脏作为对照组。对去细胞组及未去细胞组材料进行病理切片并用苏木精和伊红染色（H&E），Masson’strichrome染色，免疫组织化学染色，DNA含量分析及PCR检测抗原基因表达以评价去细胞化效果。2).将去细胞化的猪肝脏组织材料切成直径约为1.5cm的方形块，并将其随机分为三组（每组约30块），其中两组分别给予浓度为0.625%的京尼平(GP)和浓度为的0.625%戊二醛(GA)进行交联，另一只未去细胞肝脏亦切成相同大小方形块，作为对照组。然后对各组材料（GP修饰去细胞组，GA修饰去

7、细胞组，未修饰去细胞组及未去细胞组）进行形态学观察，病理切片H&E染色检测其显微结构及细胞成分清除情况，并且通过电子显微镜观察各组细胞外基质三维立体结构。②去细胞化及去细胞化后修饰的肝脏组织材料体外诱导单核细胞迁移及1四川医科大学硕士学位论文异体植入大鼠皮下局部反应实验:1).以U-937人单核细胞系进行体外迁移实验，运用碾磨器碾磨材料并高速离心方法分别提取GP修饰去细胞组，GA修饰去细胞组，未修饰去细胞组及未去细胞组的猪肝脏组织材