体外预处理对猪胰岛细胞免疫原性的影响_董维平

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1、90中华细胞与干细胞杂志(电子版)2012年5月第2卷第2期ChinJCellStemCell(ElectronicEdition),May.2012,Vol.2,No.2·实验研究·体外预处理对猪胰岛细胞免疫原性的影响董维平王煜非彭永德【摘要】目的比较多种体外预处理对胰岛细胞免疫原性的影响,筛选既能降低胰岛细胞免疫原性、又不影响胰岛细胞功能的预处理方法。方法新生猪胰岛随机分为:A组(24℃培养5d组)、B组(液氮冷冻保存组)、C组(中波紫外激光照射组)、D组[主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类抗原

2、抗体预处理组]和E组(37℃培养5d组,对照组)。以胰岛-淋巴细胞混合培养的刺激指数(SI)、SLA-DR单抗阳性细胞数和淋巴细胞计数比较各组胰岛的免疫原性;以胰岛素释放试验比较各组胰岛的功能。以上各指标五组间的检测结果差异用单因素方差分析,两两比较采用LSD法。结果预处理各组ICCs的SI值分别为2.2±0.8、1.8±0.6、2.0±1.5、2.1±1.0和7.4±2.3,各组与对照组比较,差异有统计学意义(F=30.398,P<0.01);预处理各组的ICCs中SLA-DR阳性细胞数,分别为2

3、.9﹪±0.4﹪、2.3﹪±0.8﹪、2.4﹪±0.3﹪、2.0﹪±0.8﹪和12.5﹪±5.9﹪,各组与对照组比较,差异有统计学意义(F=103.154,P=0.01);预处理各组ICCs内的淋巴样细胞数,分别为29.0±4.1、27.0±4.0、28.0±2.8、2.6±4.0和111.0±14.0,各组与对照组比较,差异有统计学意义(F=276.212,P<0.01);经预处理的ICCs与对照组的胰岛素释放试验结果,高糖浓度下各组分别为(832±157)、(592±126)、(783±109)

4、、(872±105)及(773±141)pmol/L,各组与对照组比较,差异有统计学意义(F=6.918,P=0.000),而低糖组和释放指数,各组差异无统计学意义(F=0.629,P=0.644;F=0.686,P=0.991)。结论本组资料结果表明,胰岛移植物经短期24℃培养、冷冻保存、中波紫外线激光照射和抗MHCⅡ类抗原单抗预处理,明显降低其免疫原性,同时对胰岛功能无明显影响。【关键词】胰岛细胞;预处理;免疫原性;猪Effectsofpretreatmentsofswineisletsonim

5、munogenicityofisletgraftDONGWei-ping,WANGYu-fei,PENGYong-de.TheDepartmentofDiabetesResearchCentre,ShanghaiJiaotongUniversityaffiliatedFirstPeople’sHospital,Shanghai20080,ChinaCorrespondingauthor:PENGYong-de,E-mail:pyongde@hotmail.com【Abstract】Objective

6、Toevaluatetheeffectsofdifferentpretreatmentmethodsontheimmunogenicityandfunctionoftheisletgraft.MethodsNeonatalpigisletswerefreshlyisolated,andrandomlydividedinto5groups:GroupA(culturedat24℃for5days);GroupB(cryopreservatedinliquidnitrogen);GroupC(irrad

7、iatedbymediumwaveUVlaser);GroupD(pretreatedbyMHCⅡantibody)andcontrolgroup(culturedat37℃for5days).Theimmunogenicityofisletsineachgroupwasanalyzedbyislet-lymphocytemixedculturestimulationindex(SI),thenumbersofSLA-DR-positivecellsandlymphoidcells.Thefunct

8、ionofisletsineachgroupwasevaluatedbyinsulinreleasetest.Comparisonamongthe5groupswasmadewithsinglefactoranalysisofvariance.LSDtestwasusedforcomparisonbetween2groups.ResultsSIwas2.2±0.8,1.8±0.6,2.0±1.5,2.1±1.0and7.4±2.3forGroupsA,B,C,Dand

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