褪黑激素对猪卵母细胞体外发育的影响

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1、￣单位代码３５＾＾１０６‘＿学号１１２０１２３２８００１９８５硕士学位论文褪黑激素对猪卵母细胞体外发育的影响Ｅｆｅｃｔｓｏｆｍｅｌａｔｏｎｉｎｏｎｉｏｏｃｔｅｐｇｙｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔｉｎｖｉｔｒｏｐ论文作者：李琴＞，、；指导教师？Ｉ：魏学良、学科专业：临床兽医学研究方向：兽医内科疾病与环境公害提交论文日期：２０１５年５月２０日论文答辩日期：２０１５年６月３日’…学位授予单位：西南大学＿中国？重庆２０１５年６月＿独创性声明学位论文题目：ＡＲ

2、尿本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。学位论文作者：签字曰期：上年６月ｔ？日本寧＞／Ｉ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院（筹）可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、

3、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：不保密，口保密期限至年月止）。、学位论文作者签名：导师签名：ｌ：本琴ｔｊ＾签字日期：＞左年ｔ曰签字曰期：年ｂ月曰丨ｏ月？项目资助情况本研究由－教师队伍建设创新团队（北京市）（项目编号：５０６５２２８０８６／００１）７００１／００２北京市创新团队家禽团队（项目编号：５０７５２３）资助ＴｈｉｓｒｅｓｅａｒｃｈｗａｓｓｕｐｏｒｔｅｄｂｔｈｅＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＣｏｎｔｉｎｅｎｔｏｆｐｙ

4、ｇＴｅａｃｈｅｒｓ－ＩｎｎｏｖａｎＴｅａｍｔｉｏ（Ｂｅｉｊｉｎｇ）（５０６５２２８０８６／００１），ｔｈｅＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＴｅａｍｏｆＰｏｕｌｔｒｏｆＢｅｉｉｎ５０７５２３７００１／００２ｙｊｇ（）西南大学硕士学位论文摘要摘要一褪黑激素ｎ（ＭＴ）是种引噪类激素，在人及哺乳动物体内主要是由松果腺分，其他器官和细胞也有少量分泌泌，分泌量受光照影响比较大，且呈现昼夜节律性一，般夜晚分泌多，白天分泌少。ＭＴ能够透过细胞膜及各种膜结构进入细胞器来发挥抗氧化作用。目前ＭＴ的抗氧化、抗凋亡作用在小鼠、绵羊、鸡等动

5、物卵母细胞体外成熟及早期胚胎中均有报道，但在猪卵母细胞体外成熟中报道较少。本研究以猪为试验对象，研究了褪黑激素对卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响。主要内容如下：１褪黑激素对猪卵母细胞体外发育的影响（１）褪黑激素对猪卵母细胞体外成熟的影响、挑选合格的卵母细胞，然后随机分成６组，在添加褪黑激素（分别为０Ｍ－＿－－１１Ｍ－９７５３Ｍ１０、１０Ｍ、１０Ｍ、１０Ｍ、１０）的体外成熟培养液中培养４６ｈ，统计各组－９－７卵母细胞的极体排出率。结果发现，１０Ｍ组７７．５４％和１０Ｍ组６９．２％的极体（）（）率显著高于对照组（６７．８

6、１％）和其他试验组，该两组之间差异不显著。（２）褪黑激素对猪卵母细胞孤雌胚胎发育的影响挑选合格的卵母细胞置于未添加褪黑激素的体外成熟液中培养４６ｈ，接着进＿－行孤雌激活并随机将卵母细胞放到０ｉｉ９６组添加褪黑激素（分别为０Ｍ、１Ｍ、１０Ｍ、－＇＿５－３ｌＯＭ．１０Ｍ、１０Ｍ）的胚胎培养液中继续培养。胚胎培养的第２ｄ统计卵裂率，第７ｄ统计囊胚率。结果发现，褪黑激素未能提高卵母细胞孤雌发育的卵裂率，－５对照组和各试验组间差异不显著。１０Ｍ组（２０．３１％）的囊胚率显著高于对照组９－３．４５％和１０Ｍ组（１０．６８％。（

7、））（３褪黑激素对猪卵母细胞体外发育的影响）＿９Ｍ＿５成熟液和胚胎培养液分别添加１０、１０Ｍ褪黑激素，卵母细胞体外培养４６ｈ后统计卵裂率。孤雌激活后继续胚胎培养，第２ｄ统计卵裂率，第７ｄ统计囊胚率。结果发现．６８％８１．３７％１７．８９％，对照组和试验组的卵裂率（７７和）和囊胚率（和１９．２７％）差异不显著，试验组的极体率（７８．０３％）显著高于对照组（６４．５５％）。２褪黑激素对猪卵母细胞体外发育过程中ＧＰｘ４和Ｃａａｓｅ－ｓｐ３表达的影响通过ＲＴ－ＰＣＲ方法鉴定外源性褪黑激素是否影响猪体外胚胎的ＧＰｘ４和Ｃａｓ－ｐａｓｅ

8、３基因在转录水平的表达，探寻影响猪体外胚胎发育的机理。猪卵母细Ｉ胞体外成熟及孤雌激活后