三种常见蜜蜂病毒环介导等温扩增方法的建立

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1、＼＇，（＼分类号：Ｓ８９１１０３８９单位代码：密级：学号：１１２０７４４０１２福建农林大学硕士学位论文－、Ｉ■ｉ三种常见蜜蜂病毒环介导等温扩增方法的建立＿学科门类：农学一级学科名称：畜牧学二级学科名称：特种经济动物词养研究方向：蜜蜂饲养与繁育研究生姓名：庄明亮指导教师：梁勤教授二—０兒成时间：五年四月？？：广；＿－ＶＳ８９１单位代码１０３８９分类号：：密级：学号：１１２０７４４０１２福建农林大学领士学位论文三种常见蜜蜂病毒环介

2、导等温扩堪方法的建立学科门类：农学一级学科名称：畜牧学二级学科名称：特种经济动物饲养研究方向：蜜蜂饲养与繁育研究生姓名：庄明亮指导教师：梁勤教授二—完成时间：０五年四月＇ＴｈｅＴｈｅｓｉｓｏｆＦＡＦＵｓＭａｓｔｅｒＳｔｕｄｅｎｔＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｔｈｒｅｅｃｏｍｍｏｎｂｅｅｖｉｒｕｓ－ｌｏｏｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒｍａｌａｍｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｐｐＤｅｒｅｅｃａｔｅｏｒ：ＡｒｏｎｏｍｇｇｙｇｙＴｈｅｎａｍｅｏｆｄ

3、ｉｓｃｉｐｌｉｎｅ：ＺｏｏｔｅｃｈｎｙＴｈｅｎａｍｅｏｆｍａｏｒ：ＳｅｃｉａｌＥｃｏｎｏｍｉｃＡｎｉｍａｌＲａｉｓｉｎｊｐｇＲｅｓｅａｒｃｈｆｉｅｌｄ：ＢｅｅＲａｉｓｉｎｇａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｇＳｔｕｄｅｎｔｎａｍｅ：ＺｈｕａｎｇＭｉｎｇｌｉａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｄｒ．ＬｉａｎｉｎＰｒｏｆｅｓｓｏｒｐｇＱ，Ｓｕｂｍｉｔｔｅｄｔｉｍｅ：Ａｒｉｌ２０１５ｐ，ＦｕｊｉａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＦＡＦＵ）独创性声明

4、本人声明，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答激的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果一。与我同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。＞（４学位毕业＞论文作者亲笔签名：期：２０丨５／之今＜美戶；卑乂式论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借

5、阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印。、缩印或其他复制手段保存论文保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。学位（￥４ｋ）论文作者亲笔签名：么日期：Ｚ０Ｉ５０＾＾４４指导教师亲笔签名曰期：（Ａ目录ＩｍｍＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ１脂１１１２．蜜蜂三种病毒研究进展１．１．１蜜峰病害２１．１．２蜜蜂病毒的分类及其分子生物学２１．１．３蜜蜂三种病毒的危害和发病特征５１．１．４三种病毒的传播７１．１．５三种病毒病的诊断方法９

6、１．２环介导等温扩增技术１０１１ＬＡＭＰ．２．技术原理１１１２２ＡＭＰ１．．Ｌ反应特点１１２３ＬＡＭＰ１１．．的应用１１２．３本研究的目的和意义２材料和方法１３２．１１３２１１．．１供试材料３２１．１．２主要试剂与配制３２１．３主要仪器１５．２．２试验方法１６２．２．１引物设计与合成１６２．２．２蜜蜂ＲＮＡ提取及ｃＤＮＡ的合成１７２．２．３ＬＡＭＰ检测蜜蜂三种病毒方法的建立１８２．２．４ＬＡＭＰ体系优化１９１２．２．５扩增区域的克

7、隆测序２４２．２．６敏感性和特异性试验验证２２．２．７临床样本的检测２４３２４３．１应用ＬＡＭＰ检测ＢＱＣＶ的研究结果２４Ｖ－３．１．１ＢＱＣＬＡＭＰ反应体系的优化２４－３．１．２ＢＱＣＶＬＡＭＰ外引物的ＰＣＲ反应与鉴定２５３．１．３ＬＡＭＰ与ＰＣＲ的敏感性对比试验２７３．１．４可视化ＬＡＭＰ的特异性试验２８３．１．５临床样本的检测２９３．２应用ＬＡＭＰ检测ＳＢＶ的研究结果３２－３．ＬＡＭＰ反应．２１ＳＢＶ体系的优化３２－３ＳＬＡＭＰＰＣＲ反３．２．２

8、ＢＶ外引物的应与鉴定４３．２．３ＬＡＭＰ与ＰＣＲ的敏感性对比试验３５３．２．４可视化ＬＡＭＰ的特异性试验３６３．２．５临床样本的检测３７３．３应用ＬＡＭＰ检测ＤＷＶ的研究结果３９