rituximab耐药细胞株的构建及利用基因表达谱芯片研究rituximab耐药机制的初步研究

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1、２〇１２２〇４３１户曲虔种乂嗦学号：ｘｉｌＵｉｒｓｉｔＧｕａｎｇｉＭｅｄｃａｎｖｅｙ硕±学位论文民ｉｔｕｘｉｍａｂ耐药细胞株的构建及利用基因表达谱芯片研究Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药机制的初步硏究潘梅芳：肿瘤学指营教师姓名：岑洪专业名称申请学位类型：学术型学位，ｉＩ答辩委员会主席：谢裕安答辩委员会委员：陆永奎姚平欧海跨谭晓虹二０—五年五月原创性声明本人于此郑重声明，；本人所呈交的学位论文是本人在导师指导下独立进行的研究工作

2、及取得的研究成果。除了文中特别加Ｗ注明和致谢的地，方外，本论文不包含其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果也不包）含未获得（注：如果没有其它需要特别声明的，本栏可空或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的同志、老师，均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。。本人承担本声明的法律责任签字日期／。学位论文作者签名；：年＾月日私的学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解广西医科大学有关收集、保留和使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或

3、机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权广西医科大学可Ｗ将学位论文的全部或、部分內容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印缩印或妇描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）／［；学位论文作者签名导师签字；％。／。签字日期；年＾月／日签字日期：年《月日个人简历基本情况：姓名；潘梅芳性别女民族１９８７．

4、０６；汉出生年月；：籍贯；广西贵港市政治面貌中共党员学习工作经历起止时间．所在院校或单位学历学位职称２００７－．０９２０１３．０７广西医科大学医学学±学位本科生２０１３－．０９２０１５．０７广西医科大学医学硕±学位硕±研究生研究生期间科研经历项目起止时间项目名称项目来源本人承担任务２０－１３．０３２０１４．０８活化Ｂ细胞样弥漫大国家自然科学实验参与者＇＇－ＮＦｋＢ基金资助项目Ｂ细胞淋巴瘤信号通路基因突变及其在ｃｍｏｌＥ向

5、治疗中的意义目录一、中文摘要１二、英文摘要３Ｈ、论文正文一第部分Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药细胞株的构建前胃６１材料与方法７２结１２果．３ｉｆ１３ｉｔ第二部分利用基因表达谱芯片研究Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药机制的初步研究前胃１６１材料与方法１８２淵…２５．３讨论４２参考文献４４结论５０、１四附录（缩略词表）５五、综述５３六、致谢６１２０±研究生毕业论

6、文口级硕Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药细胞株的构建及利用基困表达谱巧片研究Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药机制的初步研究Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药细胞株的构建及利用基因表达谱及片硏究民ｉｔｕｘｉｍａｂ耐药机制的初步研究中文摘要一ｔｕｘｍａｂ耐第部分Ｒｉｉ药细胞株的构建－目的：构建Ｒｉｔｕｘｉｎｍｂ耐药Ｂ细胞淋己瘤细胞株Ｊｅｋｏ１／Ｒ和Ｒａｉ／Ｒ。ｊ－；ｋｏａｉ方法采用体外低浓度梯度递增法，将亲本Ｊｅ１、Ｒｊ细胞培养于含一定Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ浓度（ｌｘ／ｍｌ、５／ｍｌ、ｌＯ＾／ｍｌ、２０

7、ｊ＿／ｍｌ、ＳＯ＾／ｍｌ）的细｜ｇ＾ｐｇ）ｇｐｇ一胞培养液中定时间，利用流式细胞术测亲本细胞及耐药细胞表面ＣＤ２０－、ｔｕｘ抗原表达，进而判断所培养的Ｊｅｋｏ１／ＲＲａｊｉ／Ｒ细胞为Ｒｉｉｍａｂ耐药细胞－１／Ｒ株，后将ＪｅｋｏＲ、Ｒａｉ／Ｒ细胞培养于含５０＾ｌ／ｍ＾浓度ｉｔｕｘｉｍａｂ的细胞培ｊｇ。养液中培养，Ｗ维持其耐药表型Ｊｅｋｏ－结果：流式细胞术测得亲本１、Ｒａｉ细胞表面ＣＤ２０表达分别为ｊ９９、－Ｒ、Ｒａ达依．９％９６．６％，而Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ耐药Ｊｅｋｏ

8、１／ｉ／Ｒ细胞表ＣＤ２０表ｊ面〇次为０．３％、０．７／〇。结论：采用体外低浓度梯度递增法，成功构建Ｒｉｔｕｘｉｎｍｂ耐药细胞株Ｊｅｋｏ－１／Ｒ、Ｒａｉ／Ｒ，４勾建的耐药细胞株可作为研究Ｒｉｔｕｘｉｍ化耐药机制的理ｊ想的细胞模型。关键词：淋己瘤，Ｒｉｔｕｘｉｍ化，药物耐药，流式细胞术基金项目：１．国家自然科学（８１１６０２９８）；＾２．广西医疗卫生重点科研课题（重２０１１０７７）；－３．广西医疗卫生适宜技术研究与开发课题（Ｓ２０１３