蛹虫草菌纤溶酶的固体发酵生产及分离纯化

《蛹虫草菌纤溶酶的固体发酵生产及分离纯化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、、＇、．知漏Ｉ＇＇、■－齐齐哈尔大学？ＱＩＱＩＨＡＲＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ．．磁：：＇■气：讓硕±学位论文蛹虫草菌纤溶酶的固体发酵生产及分离纯化遗传学学科专业：作者姓名：王玉指导教如巧：刘晓兰论文提交日期：２０１己年４月３０曰论文答辩日期：２０１５年６月１３日答辩委员会主席．：平文祥论文评阅人：汪春蕾李杰．２—＞ｇ－＂ｒ学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导卿的指导下进行研究工作，本所取得的成果，除文中巴经注明引用内容和致谢

2、的地方外。尽我所知论文不包含其他个人或集体己经发素的研究成果，也不包含其他巴申请学一同工作的同志对本研究所做的贡献均位或其他用途使用过的成果。与我己在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处。，本人愿意承担相关法律责任著妳增化癖ｆ杉秦＇私仁．施非如￣学位论文题目：＾２＾２日期〇ｉｒ曰王枝：｛年月＾作者签省：齐齐哈尔大学学位论文版权使用授权书本人完全了解学校有关学位论文知识产权的规定，在校攻读学位期间。学校有论文工作的知识产权属于齐齐哈尔大学，允许论文被查阅和借阅权保口或机构送交论文的复印件和电子版，可队将留论文并向国家有关部

3、检本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行索，可臥采巧影巧、縮印、或担描等复制手段保存和汇编本学位论文。心：学位论娜日化若祭、日期：玉＾年＾月心違：己王日朔：地＾年＾月也日导师兰如硕士学位论文蛹虫草纤溶酶的固态发酵生产及分离纯化OptimizationofSolidFermentationconditionandPurificationofafibrinolyticenzymefromCordycepsmilitaris作者姓名：王玉学号：2011917243学科专业：遗传学研究方向：微生物遗传指导教师：刘晓兰教授答辩日期：2015-6-13，M

4、astersDegreeDissertationOPTIMIZATIONOFSOLIDFERMENTATIONCONDITIONANDPURIFICATIONOFAFIBRINOLYTICENZYMEFROMCORDYCEPSMILITARISCandidate:WangYuStudentnumber:2011917243Major：GeneticsMajorfield:MicrobialGeneticsSupervisor:Prof.LiuXiao-lanReplydate:2015.06摘要以大米为主要基质，对蛹虫草菌生产纤溶酶的固态发酵工艺条件进行研究，对其产生的代谢

5、产物纤溶酶进行分离纯化。对蛹虫草菌固态发酵生产纤溶酶的种子培养条件、培养基组成和培养条件进行了研究。对以马铃薯汁、葡萄糖、蛋白胨和无机盐混合液为液体种子培养基的蛹虫草液体种子生长曲线进行测定，确定适宜的蛹虫草液体种子培养时间为4天；利用单因素实验和正交实验对以大米为基础培养基的蛹虫草菌固态发酵产纤溶酶条件进行优化，结果表明：以麸皮和大米的混合物是蛹虫草固态发酵产纤溶酶的适宜原料，其适宜配比是1:1，培养基加水量75%（v/w），无机盐CaCl2和（NH4）2SO4的适宜添加量分别为0.1%(w/w)和2%(w/w)，培养基初始pH自然；适宜培养条件为接种量25%（v/w），

6、培养时间5d，发酵液浸提时间为4h。优化条件下的固体发酵纤溶酶活力达167±1U/ml。对蛹虫草固态发酵产生的纤溶酶进行了分离纯化。蛹虫草固态发酵物的浸提液经离心去除杂质后，顺次采用30%~60%硫酸铵分级盐析、Octyl-SepharoseFF和Phenyl-SepharoseHP疏水相互作用层析、Superdex75凝胶层析方法对纤溶酶进行分离提纯，研究了每一步纯化条件，提纯的蛹虫草纤溶酶比活力为1179.93U/mg，纯化倍数为40.12，活力回收率5.67%。用SDS-PAGE电泳法分析纯化后纤溶酶的纯度，结果表明，该纤溶酶已达到电泳纯，纤溶酶相对分子质量为3200

7、0±2000Da。关键词：大米；固态发酵；蛹虫草；纤溶酶；分离纯化IIOptimizationofSolidFermentationconditionandPurificationofafibrinolyticenzymefromcordycepsmilitarisAbstractThedissertationfocusesonoptimizationofsolidfermentationconditionofproducingfibrinolyticenzymewithriceasthemainrawmateri