苜蓿花药组织培养及花培再生植株倍性鉴定

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1、－？？－＊人．＇片＇．？．－一．－？．．Ｓ３％．学校代码１０９分类号．４１２ＵＤＣ６３３．２学号２０１２２０４０４８Ｖ成義名落寺少＾變硕±学位论文，‘、．－－首清花药组织培养及花培再生植株倍性鉴定，ＡｎｔｈｅｒＣｕｌＵｉｒｅｓｏｆＡｌｆａｌ估ａｎｄ化ｅＰｌｏｉｄＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｙｏｆＲｅｅｎｅｒａｔｅｄＰｌａｎｔｓｇ＊■－、‘■－．、＊．？ｉ，．．．Ｖ？、：．＇－‘．ｔ’、；‘＜，，申请人：熊梅：．＇

2、＇Ｖ－．＂，学科口类：农学．＇－‘＇古ｒｒ＞学科专业：草学’研究方向：牧草遗传育种苗指导教师：石凤翊教授＾＾：＾托；＂，八―＇．．．乂：？？？，＜．’－论文提交曰期：二〇五年六月古’‘ｆ■．．．．■—．．ｔ＇＇＾＾－■．．－’．二＇：；’ｖ．、、一－－‘）；ｒ＇＇．■■－■＇＇．■－■；＇１Ｖ＊＇．，．■－＇三－．■＇－？一．＇＇－Ｖ．Ｔ内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的

3、学位论文是我本人在导师指导下进行的研巧工作及取稱的研巧成果。据我所知ｉｌ，除了文中特别加ｉ＾橋注和致谢的地方外，论文中不包巧其他人己经发表或撰写过的硏究成果，也不包巧为获得我校或其他教育抓构的学位或证书而使用过的材料一，与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。一切相关责任申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担，＜作施文作者签名：‘筵轉日期：议［？巧蒙古农业大学巧究生学位论文版枚使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知巧产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属巧蒙古农业大学

4、。本人保证毕业离校后，发表论文或使巧论文工作成果时署名单位为巧蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为巧蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或化构送交论文的复巧件巧电子文档，化许论文被査阁和借阅。学巧可凶公布学位论文的全部或部分内容（巧密内容陈外），采用影印、缩巧或其他手致保存论文，论文作者签名；辕猶指导教师签名：日期：摘要成’ｅｃｆｌｏｖｆｌｎｆｌ（ＭａｒｔｉｎｕａｎＮｏ．ｌ）是草原１号杂花首猜（Ｍｇ．ｃｖ．Ｃａｏｙ宫猜属多年生四倍体植物，是从紫花首猜和黄花首猜杂交后代中选育出的育成品种。选育纯合亲本可充分利

5、用杂种优势，杂交后代性巧更优，而花药沮织培养是培育纯合亲本最快最有效的途径之一。本研巧草原１号杂花首猜雄性不育株花药为外植体，进行花药组织培养，通过庶糖、ｐＨ、不同激素浓度配比，优化首猜诱导愈伤培养基和分化培养基。并对已培育的花药培养再生植株进巧倍性鉴定，先通过间接鉴定（株高，主茎粗，再生速度，ＳＰＡＤ值）聚类筛选，对筛选出单倍体植株进行根尖体细胞染色体数和ＳＳＲ分子标记。主要研巧结果如下：’（１）经４Ｃ预处理花蕾２４ｈ，进行花药组织培养，花药形成愈伤的适宜培养基：－Ｉ／Ｌ２４－Ｄ＋＋０．２５ｍ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍ／ＬＮＡ１ｍ／ＬＫ

6、Ｔ５％．７％ｍｇ，ｇｇＡｇ＋庶糖＋０琼脂，〇ｐＨ为５．８，出愈率为８０／〇。最适宜的分化培养基：０．５ｍｇ／ＬＫＴ＋Ｇ．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％庶糖＋０．７％琼脂，ｐＨ为５．８，出愈率为２５％。口）对７５株首宿花药组织培养再生植株，利用间接的倍性鉴定方法判断其中单倍体植株有８株．７％。，雄性可育与雄性不育的巧培植株各有４株，占总株数的１０结合染色体数鉴定结果，初步判定有单倍体或双单倍体植株４株。（３）在各鉴定方法中，株髙、气孔数和保卫细胞叶绿体数结合起来分析倍性较为准确。关键词：组织培养；花药；倍性鉴定；再生植株；单倍体ＡｎｔｈｅｒＣｕｌｔ

7、ｕｒｅｓｏｆＡｌｆａｌ拉ａｎｄ巧ｏｉｄＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ化ｅｙＲｅｅｎｅｒａｔｅｄＰｌａｎｔｓｇＡｂｓｔｒａｃｔＭｅ況ｃａｇｏｖａｒ／ｔｆＭａｒｔｉｎ．ＣＶＣａｏｙｕａｎＮｏ．１ｉｓａｐｅｒｅｎｎｉａｌｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｐｌａｎｔｓｏｆＡｆｅ成ｃａｏＬｃｏｍｅｓｆｒｏｍＭｅ说ｃｏｇｏｓ幻ｄｖａａｎｄＭｅ油ｃ幻。ｃａｔｏＬ．ｂｒｅｅｄｉｎｏｆｈｂｒｉｄｓｇ，各如ｇｙ，ｉｎｒｄｅｒ化ｌｉ