辣椒花药培养再生植株的倍性鉴定.pdf

《辣椒花药培养再生植株的倍性鉴定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、贵州农业科学2015，43(6)：18～21GuizhouAgriculturalSciences[文章编号]1001—3601(2015)06=0291-O018—04辣椒花药培养再生植株的倍性鉴定付文婷，何建文，杨红，邢丹，张爱民，苏丹，韩世玉(贵州省辣椒研究所，贵州贵阳55O0O6)[摘要]为指导辣椒单倍体育种技术在实践中的应用，对辣椒8024花药培养再生植株的染色体倍性进行鉴定，以DNA流式细胞仪测定法的鉴定结果为依据，研究利用染色体压片计数法和花药培养再生植株形态及坐果情况鉴定辣椒花药培养再生植株倍性的可靠性。结果表明，花药培养再生

2、植株是倍性水平不同的混倍群体，但各倍性植株所占的比例不同，DNA流式细胞仪测定法和染色体计数法的吻合度达93，与坐果鉴定结果一致。鉴定结果可直接决定其结籽情况。[关键词]辣椒；花药培养；再生植株；流式细胞仪；染色体计数；倍性鉴定[中图分类号]$641．3[文献标识码]APloidyIdentificationinRegeneratedPepperPlantsfrOmAntherCultureFUWenting，HEJianwen，YANGHong，XINGDan，ZHANGAimin，SUDan，HANShiyu(GuizhouPepperI

3、nstitute，Guiyang，Guizhou550006，China)Abstract：Toguidetheapplicationofhaploidbreedingtechniqueinpractice，theploidywasidentifiedinpopulationofantherculturederivedpepper8024plants．BasedontheresultsofDNAflowcytometric(FCM)analyticaltechnique，theauthorsstudiedthereliabilityofder

4、ivingpepperploidybyusingchromosomecounting，fruitsettingandmorphology．Results：Regeneratedpopulationsfromanthercultureareusuallymixedploidy，theproportionofdifferentploidylevelsaredifferent．Theresultsofwhichdeterminetheseedsettingstatusdirectly．ThecoincidencebetweenFCMandchrom

5、osomecountingiShighupto93，whichisinaccordancewithfruitsettingresults．Keywords：pepper；antherculture；regeneratedplant；flowcytometry；chromosomecounting；ploidyjdentificatjon在辣椒单倍体育种中，通过辣椒花药培养出的1材料与方法再生植株，往往是染色体倍性水平不同的混合群体_1。]，早期的倍性鉴定是构建DH群体十分重要的1．1供试辣椒技术环节_4]，所以有效的倍性鉴定关系到单倍体的供试

6、材料为8024，在贵州省辣椒研究所试验基育种进程，也是了解其遗传背景和进一步应用的基地种植。自2012年4月下旬开始，取辣椒材料础。传统的倍性鉴定方法有染色体压片计数法_5]、8024花蕾进行花药培养，采用MS培养基，培养方观察开花结实情况_6和叶片气孔保卫细胞的大小及法参考文献[13]。获得花药培养再生植株15株。其叶绿体数目的测定进行倍性判断_7_9I，前者程序复再生植株均为2012年5—9月于贵州省辣椒研究所杂耗时多，但准确性高；中间者的鉴定时期太晚，导综合实验室通过花药培养获得。选用8024正常二致单倍体材料无法收种，浪费育种材料；后

7、两者易受倍体作为对照材料。操作者的经验影响，导致鉴定结果不同口。DNA1．2根尖染色体压片计数法流式细胞仪测定法通过测量核DNA含量进行倍性分别取8024正常组培苗和8024花药培养再生鉴定，该方法具有快速、准确和操作简便等优点，但植株0．5～1cm长的根尖，先经过秋水仙素预处理检测费用大，只适宜于小批量的植株倍性检测l1]。3h，再经卡诺固定液固定24h后，用清水冲洗3不同的倍性鉴定方法会导致不同的鉴定结果。所以次，再用1mol／LHC1在6O。C水浴条件下解离3～寻求一种准确、快捷且有效的方法非常必要，对加速5min，最后用卡宝品红染色制

8、作压片，在10×4O倍辣椒育种进程也具有重要意义。笔者以自育辣椒为显微镜(OlympusX71)下观察根尖染色体并计数，试材，以DNA流式细胞测定结果为依据，研究染