牛病毒性腹泻病毒持续性感染的分子机制研究及其定点突变株的构建

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4、licationofbovineviraldiarrheavirusandconstructionofsite-directedmutationofbovineviraldiarrheavirusADissertationSubmittedtoShiheziUniversityfortheDegreeofDoctorofAgricultureByFuQiang(AnimalGeneticsBreedingandReproduction)DissertationSupervisor:Prof.ChenChuangfuJune,20

5、15课题来源国家自然科学基金新疆联合基金重点支持项目牛病毒性腹泻病毒持续性感染的分子机制研究项目编号：U1303283国际合作项目牛病毒性腹泻防治新技术的研究项目编号：2013DFR30970石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位

6、论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。牛病毒性腹泻病毒病毒持续性感染的分子机制研究及其突变株的构建中文摘要牛病毒性腹泻病毒（bovineviraldiarrheavirus,BVDV）是造成猪、牛、羊和鹿等家畜动物和部分野生动物的牛病毒性腹泻-黏膜病（bovineviraldiarrhea-mucosaldiseas

7、e,BVD-MD）的主要病原体。该病毒在全球范围内广泛传播，对畜牧业的健康发展和牛源生物制品（血清和冻精等）质量提高等造成巨大的威胁。但是，目前我国尚无有效的药物和防控措施抵御BVDV感染，其主要原因之一是BVDV持续性感染的分子机制尚未系统阐明。而大量的研究表明细胞自噬和凋亡等信号通路直接影响病毒持续性感染，而且microRNA（miRNA）也能通过调控细胞自噬和凋亡等信号通路进而影响病毒持续性感染，所以本研究全面探索BVDV、miRNA、自噬和凋亡之间相互作用的分子机制，为阐明BVDV持续性感染的分子机制提供理论依据；同时通

8、过定点突变和反向遗传学技术构建BVDV定点突变株，为研发抗BVDV有效方法奠定了技术和理论支持，也为家畜的抗病育种工作提供新的方法和理论依据。目的：本研究以BVDV标准株NADL为研究对象，探索BVDVNADL调控宿主细胞MDBK的细胞自噬和凋亡通路及自噬改变对