甘肃甘南野生羊肚菌多样性及其液体发酵工艺研究

《甘肃甘南野生羊肚菌多样性及其液体发酵工艺研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学博士学位论文甘肃甘南野生羊肚菌多样性及其液体发酵工艺研究TheDiversityandLiquidFermentationTechnoloyofWildMorchellaspp.inGannanRegionofGansuProvince王龙指导教师姓名王生荣教授（甘肃农业大学兰州730070）学科专业名称草地生物多样性研究方向草地微生物多样性及其资源利用论文答辩日期2014年05月28日学位授予日期2015年06月10日答辩委员会主席李春杰教授评阅人武晓东教授呼天明教授魏臻武教授2015年06月甘肃农业大学博士研究生学位论

2、文摘要本文通过对甘肃甘南藏族自治州境内收集到的117株野生羊肚菌Morchellaspp.宏观形态特征、显微结构特征和基于ITS片段的分子生物学研究，探讨了该地区野生羊肚菌的分类地位及其系统发育关系；同时运用生物学和统计学的研究方法，讨论了羊肚菌M.esculenta液体菌种生长动力学模型，主要研究结果如下：1、形态学观察（1）对收集到的117株野生羊肚菌Morchellaspp.进行形态学观察，初步将其规划为10种，分别为肋脉羊肚菌M.costata(Vent.)Pers.，尖顶羊肚菌M.conicaPers.，黑脉羊肚菌M.angusticepsPeek.，小羊肚

3、菌M.deliciosaFr.，羊肚菌M.esculenta（L.）Pers.，普通羊肚菌M.vulgaris(Pers.)Boud.，宽圆羊肚菌M.rotunda(Fr.)Boud.，粗腿羊肚菌M.crassipes(Vent.)Pers.，褐赭羊肚菌M.umbrinaBoud.和高羊肚菌M.elataFr.。（2）经单孢分离纯化的羊肚菌Morchellaspp.培养菌落在复合PDA培养基上均出现菌丝体颜色逐渐加深的现象，由最初的无色透明渐变为淡黄色，最终变为黑褐色；同时，菌丝分泌的褐色素使复合PDA培养基也变为黑褐色。（3）在数字式目镜显微成像仪下，羊肚菌Morc

4、hellaspp.菌丝生长初期为无色透明，生长中后期呈现黄褐色透明，且表面光滑，菌丝呈“桥连状”或“竹节状”，并有分枝且交织成网；子囊近圆柱形，一般含有8枚孢子；孢子椭圆形，无色，平滑；侧丝细长，顶部稍粗。（4）羊肚菌Morchellaspp.菌核呈现土黄色或黄褐色，仅从其菌核表面分辨不出有关羊肚菌的任何可识别信息。2、分子生物学研究（1）将初步依形态分类鉴定的10株羊肚菌（GN-M1、GN-M2、GN-M3、GN-M4、GN-M6、GN-M9、GN-M10、GN-M12、GN-M14、GN-M22）和另外6株未能在相关资料中查阅到且尚不能确定的羊肚菌菌株（GN-M1

5、7、GN-M19、GN-M25、GN-M27、GN-M31、GN-M32）进行分子生物学研究。经分子鉴定得知，16株供试羊肚菌共归纳为5种，分别为黑脉羊肚菌M.angusticeps（GN-M1、GN-M2、GN-M6、GN-M10），羊肚菌M.esculenta（GN-M3、GN-M4、GN-M9、GN-M12），高羊肚菌M.elata（GN-M14、GN-M22、GN-M17、GN-M19），粗腿羊肚菌M.crapssipes（GN-M25、GN-M31）和尖顶羊肚菌M.conica（GN-M27、GN-M32），并且这5I甘肃农业大学博士研究生学位论文种羊肚菌主

6、要归类于黄羊肚菌类群（羊肚菌M.esculenta，粗腿羊肚菌M.crapssipes）和黑羊肚菌类群（尖顶羊肚菌M.conica，黑脉羊肚菌M.angusticeps，高羊肚菌M.elata）。（2）根据最大简约法（MP）和邻接法（NJ）构建的分子进化树得知，两种分子进化树拓扑结构基本相似，并且Bootstrap验证都有很高的支持率，说明其系统关系有很高的可信度，同时也说明本研究为该地区羊肚菌Morchellaspp.的系统分类提供了较为准确的分子性状依据。3、生长动力学研究运用Monod模型、Logistic模型和1stOpt（FirstOptimization）

7、软件对羊肚菌M.esculenta生长过程进行拟合试验。通过分析比较，最终选择Logistic模型和1stOpt拟合模型作为此次试验羊肚菌M.esculenta深层发酵生长动力模型，建立形式如下：1stOpt模型：2.1109659−.000303027t+.0000225836tC=x1−.0012629936485t+.00001106338392t2(t=12,24,……,120,t为正整数;Cx∈(1.2313,13.767),Cx为实数)Logistic模型：dCxCx=.00043561(−)Cxdt14.02(t=12,24,……,12