烟草香气突变体鉴定及挥发性香气成分分析

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院学位论文烟草香气突变体鉴定及挥发性香气成分分析IdentificationofFragrantMutantsofNicotianatabacumandAnalysisofVolatileFragrantComponents硕士研究生：焦禹顺指导教师：王元英研究员申请学位类别：农学硕士专业：作物遗传育种研究方向：作物遗传育种理论与方法培养单位：中国农业科学院烟草研究所中国农业科学院研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalScience

2、sDissertationIdentificationofFragrantMutantsofNicotianatabacumandAnalysisofVolatileFragrantComponentsM.S.Candidate：JiaoYushunSupervisor：Prof.WangYuanyingMajor：CropGeneticsandBreedingSpecialty:TheTheoryandMethodofCropGeneticsandBreedingMay2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导

3、师指导下进行的研宂工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：技知H时间：年r月21曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意

4、中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容a研宂生签名:时间：zwt年t月2之曰中国农业科学院硕士学位论文评阋人、答辩委员会签名表论文题目难1?.宅宮⑪丰鉴受及釋廷忮香毛成令令祈作物遗传育作物遗传育种论文作者焦禹顺专业研究方向-----------------种理论与方法指导教师王元英培养单位（研究所）烟草研究所硕（博)姓名职称单位专业签名导师评阅人硕导口博导口硕导口I答辩主席博导口硕导口刘家尧教授青岛农业大学分子生物学博导si硕导口中国科学院青岛生物周功克研宂员分子生物学博导5/能源与过

5、程研究所硕导口隋正红教授中国海洋大学分子生物学博导0答硕导3郭立忠教授青岛农业大学微生物学博导口辩硕导口中国科学院青岛生物付春样研宂员分子生物学傅导吖能源与过程研究所委硕导a中国水产科学研究院张庆利研宂员海洋生物学博导口黄海水产研究所员國硕导口山东省农业科学院花单世华研宂员遗传育种博导gf生研宂所專1硕导口博导口会议记录（秘书)文柳滯论文答辩时间地点OQIS年SI^OQ背二会认直摘要烟草是世界上重要的经济作物，而香气是烟叶品质最重要的决定因素之一。本研究对通过甲基磺酸乙酯（EMS）诱变中烟100并筛选鉴定获得的5个香气突

6、变体fgr1-fgr5进行了鉴定。分别在光学显微镜下观察并统计突变体的腺毛密度；使用PEN3型便携式电子鼻系统对新鲜烟叶和烤后烟叶挥发性香气成分进行检测，并对电子鼻响应值进行主成分分析和聚类分析；以两个香型突出的突变体与中烟100构建了抑制性差减文库，并从中挑选香气代谢相关基因；对香气合成相关基因进行实时荧光定量PCR，研究它们的表达情况。得到以下主要结果：（1）分别取旺长期、现蕾期、盛花期、成熟前期、成熟后期的突变体的全展叶，在光学显微镜下观察并统计腺毛密度。与中烟100相比，这5个突变体表现出不同的成熟性状和很高的腺

7、毛密度，这两个性状都与烟草香气有关，其中腺毛密度最高的是突变体fgr3和fgr4。（2）分别对香气突变体的新鲜烟叶和烤后烟叶的挥发性香气成分进行电子鼻检测，通过比较新鲜烟叶和烤后烟叶的电子鼻响应情况发现，烟叶在成熟和烘烤过程中发生了明显的化学成分变化；从电子鼻雷达响应图上可以看出，电子鼻对不同突变体的新鲜烟叶的挥发性成分具有不同的响应值和响应模式，每个材料都有特异的指纹图谱；主成分分析和聚类分析发现，可以将突变体分为2种类型：“晾晒烟类型”和“烤烟类型”。（3）分别取“晾晒烟类型”突变体fgr3和“烤烟类型”突变体fgr

8、4的盛花期样品，分别与中烟100构建正反向差减文库，从这4个差减文库中随机挑取1536个阳性克隆进行测序，得到1017个高质量ESTs，并组装成202个unigenes。经过功能注释和GO分析，从这些unigenes中筛选到12个与烟草香气代谢相关的基因。（4）以5个生长时期的突变体fgr3、fgr4和中烟100的叶