天祝白牦牛kap家族基因克隆、原核表达及其在皮肤中的表达分析

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1、分类号：Ｓ８密级：公开馨＊《茄Ａ藏＃硕±学位论文题目：天祝白倦半胤Ｐ家族基因巧隆、原核寨达及其在皮肤中的表达分析烛名：化良斌学号：￥。２１４０４６７学晓－：生命科学与工超学院专业：动物遗传育种与巧殖硏巧方向：现代生物技术与动物有＃辱师：巧和平敵巧闻萍研巧员二〇—五年五月Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｋｉｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＫＡＰｅｎｅｆａｍｉｌｉｎＴｉａｎｚｈｕｗｈｉｔｅｇｙａｋｙＡＴｈｅｓｉｓＳｕ

2、ｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＬｉａｎｇｂｉｎＺｈａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ；Ｐｒｏｆ．ＨｅｉｎＰａｎｐｐｇＰｒｏｆ．ＰｉｎＹａｎｇＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓｙＬａｎｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导Ｆ所完成的论义义相关的作品，知识产权１ＨＭ脚北民族大学。本人完全了解閒北民族大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权西北民族大学可Ｗ

3、毎本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用任何复制手段保存和＇汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该一论文葺接相关的学术论文或成果时，第署名单位仍然为西北廣族大学。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名；导师豁名曰期：貨文口？■西北民族大学生命科学与工程学院２０１２级动物遗传育种与繁殖学硕±研究生毕业论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用化人己经发表或未发表的。成果、数据、观点等，均已明确注明出处陈文中已经注明引用的内。容外，不包含任何其他

4、个人或集体已经发表或撰写过的科研成果对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。？论文作者签名．２０：日期：Ｗ王．［ＩＩ西北民族大学生命科学与工程学院２０１２级动物遗传育种与繁殖学硕±研究生毕业论文摘要一巧牛Ｗ全身密生长毛及绒毛而得名，是唯产绒的牛种，天祝白轮牛是特有的产白色绒毛的品种，，由于白色绒毛有利于染色因此降低了纺织业中染色的难度。角蛋白关联蛋白（ＫＡＰ）作为主要的绒毛蛋白，在绒毛的生长中起着重要作用ＡＰ家族蛋白一。本试验旨在通过研究Ｋ为筛选控制绒毛生长的主效基因奠定定的基础。该研

5、究选取了ＩＣＡＰ家族的四个基因必４戶＆４戶１厶反ＡＰｙ／．ｉ和化４尸７义７作为研究对象。根据相应的四个基因在Ｇｅｎｂａｎｋ中寻找报道的黄牛的序列设计它们的引物，通过ＰＣＲ扩增的手段得到这四个基因的目的片段，运用ＴＡ克隆技术获得其完整编码区（ＣＤＳ）序列并使用生物信息学软件对基因进行分析。将克隆得到的目的片段转入表达载体并用大肠杆菌（Ｅｃｗ７）表达蛋白质。运用ｅａ－ＰＣＲ技术＆４Ｐ家族基因在绒毛生长期和休止Ｒｌｔｉｍｅ检测天祝白巧牛期皮肤组织中这四个基因之间的表达差异。研究结果如下：（１）通过ＴＡ克隆得到了化４户人／，必４户３．７，／＾４戶化７和必４户化／基

6、因的完整ＣＤＳ区序列。基因完整的编码区长度为５（Ｍｂｐ，所编码的蛋白质含有白含有Ｈ－１６６个氨基酸，ｉｈｓｕｌｈｕｒｋｅｒａｔｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｒｏｔｅｉｎ；该蛋白属于亲水性蛋ｇｐｐ家族蛋白的完整结构域，共含有６个磯酸化位点，该蛋白在线粒体上发挥生物学，，作用，二级结构含有ａ螺旋，延伸链Ｐ转角无规卷曲四种结构；Ｋ４Ｐ义Ｊ基２９７ｂ，因完整的编码区长度为ｐ，所编码的蛋白质含有９８个氨基酸该蛋白属于亲水性蛋白，含有Ｋｅｒａｔｉｎ，ｈｉｇｈｓｕｌｐｈｕｒｍａｔｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎ家族蛋白的结构域，共含５，二有个磯酸化位点，该蛋白在细胞核和细胞质中发挥生

7、物学作用级结构含有，转角８０ｂ，延伸链Ｐ，无规卷曲Ｈ种结构；基因完整的编码区长度为４ｐ所编码的蛋白质含有１５９个氨基酸，该蛋白属于亲水蛋白，含有完整的ｅｒａ－Ｋｔｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ家族蛋白的结构域，共含有１８个磯酸化位点，该蛋白，二级结构含有延伸链必１尸７义７，无规卷曲两种结构在线粒体上发挥生物学作用；基因完整的编码区长度为４９５ｂｐ，所编码的蛋白质含有１