伪狂犬病毒sa215-t的构建与神经传导研究

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2、？．＼．、’‘、一■．、—ｉ．、、、．女，指导教师徐志文教授；？Ｖ？：■＇Ｖ巧：、Ｖ＜学科专业预防兽医学心二、－、、、．冷病病原分子生物学＾、研巧方向动物传染，．苗、Ｉ、、、．＇，．ｒ－＇Ｖ＼：：—、＇六＇、‘Ｉ■、．．ｊＶｊ．ｉ．吟＇‘－Ｉ．．ｒ＇．＇＇－Ｖｎ京气．＇＇—、＇中－－．５．－．．．．．＾＇，．＼冷＇—．．衝＇■＇？．－—ｕ＇ｃＶ；；．．．？，＇？：过－。．；＇■．

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4、ｇａｔｉｏｎｏｆｉｔｓｎｅｒｖｅｃｏｎｄｕｃｔｉｏｎｒｏｐｅｒｔｉｅｓｐＢｙ：ＵＢｉＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙ：Ｐｒｏｆ．ＺｈｉｗｅｎＸｕＭａｏｒ：ＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｍｅｄｉｃｉｎｅｊｙＣｈｅｎｇｄｕＳｉｃｈｕａｎＪｕｎｅ２０１５论文独削性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取，学位论文中不包得的成果。尽我所知，除了文中将别加Ｗ标注和致谢的地方外含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学一或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我

5、同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：？年《月广《曰ｗｒ关于论文使用授巧的声明；本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被査阅和借手段保存、汇编学位论文。同意四川农业阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名；年＾月／屋曰＾／日导师签名：典尸年月告四川农业大学硕±毕业论文中文摘要一伪狂犬病毒具有侵染神经的能力，利用这性质，该病毒

6、己成功应用于对内脏。伪狂犬病毒减毒株神经传导是目前较热口的研巧方、腺体和肌肉的神经标记向。了Ｅ、ｌ和Ｕ巧Ｈ个基因，其中班和ｇｌ是伪狂犬病毒重减毒株通常缺失ｇｇ要的毒力基因，缺失后可使宿主的致死时间更长，而ＵＳ９的功能主要为协助ｇＢ。等必需膜蛋白的顺行转运，缺失后的病毒在突触间将执行严格的逆向转运？采用Ｌｉｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ３０００转染试剂，将ＰＰ的质粒与伪狂犬病毒化基因组ｐ－２１细胞ｌ／ＤＮＡ共转染ＢＨＫ，蚀斑筛选ｇｇＥ／Ｕ巧重组缺失病毒，并命名为、－ｌｔ、ＳＡ２１５－Ｔ。采用ＰＣＲ、基因测序ｗｅｓｔｅｍｂｏ电镜检查和生长曲线测定重沮病－－－

7、毒ＰＲＶＳＡ２Ｔ。结果：ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ未见ＳＡ２１５Ｔ与Ｅ抗体发生显色反应，１５ｇ其电镜形态与巧毒无明显差异，重组病毒与亲本毒在细胞中的生长曲线差异不明显且达到了较高的病毒滴度。－Ｔ－为探索Ｈ种不同伪狂犬毒株ＳＡ２１５，亲本毒化和ＢａｒｔｈａＫ６１对神经的传二，导作用，本实验Ｗ小鼠化头肌反射为模型统计了小鼠攻毒后的存活时间并建立了检测脊髓伪狂犬病毒分布的免疫组化方法：Ｆａ小鼠平均存活时间为。结果５－－Ｐ＜００１４３ＢｒｔｈａＫ６１（１２０．６７ｈ