含单一loxp位点重组伪狂犬病毒的构建

《含单一loxp位点重组伪狂犬病毒的构建》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、扬州大学硕士学位论文含单一loxP位点重组伪狂犬病毒的构建姓名：田瑞鹏申请学位级别：硕士专业：动物学指导教师：孙怀昌201106 田瑞鹏：含单一��位点重组伪狂犬病毒的构建��坏阒刈槲笨袢�《镜墓菇╨�������硕士研究生：田瑞鹏师：孙怀昌���琍��撬ü上咦碊�病毒，其基因缺失苗不仅能有效预防伪狂犬病，而且可作为构建其他活载体疫苗的常载体。目前重组重组，其操作相对简单，现已广泛应用于微生物和动植物基因组的改造，其中应‘为了简化重组��墓菇ú街瑁�狙芯扛�軵��区序列设计两对引物，��呙缰昊�蜃槲D０澹��肞�扩增的�基因片段

2、为同源臂，构建的重组病毒可在��缸饔孟虑谐鼼�报告基因，获得含单一��位点的重组病毒��．��，进而通过部位特异重组的方式与目的载体发生重组，使得重组 �瓺．�����篟������瑆���������������������������������．����瑃���������������������瑆�����—�����甌�����������������������������������������������．���������琖��������������������������������������������

3、����������瓵����������—��／��������������，��� 田瑞鹏：含单一��位点重组伪狂犬病毒的构建�����������琾������������������籸��������籆�／�����； 扬州人学硕士学位论文符号说明碱基对�����疭�����������������������������胎牛血清������������千碱基对千道尔顿毫克���������光密度��������������聚乙烯亚胺 田瑞鹏：含单一��位点重组伪狂犬病毒的构建���������� �扬州人学硕十学位论文

4、犬病的病原，以发热、奇瘁�砻挥写酥种⒆�、脑脊髓炎为主要特征，妊娠母猪��病原学特性双层膜构成。��心夷ぃ�夷夷け砻娉び杏氩《靖腥居泄氐脑��一��呈放射病毒基因组的存在。��基因组结构及功能 田瑞鹏：含单一��位点重组伪狂犬病毒的构建���蜃橐运ü上咦碊�的形式存在，在细胞核内时形成高分子量的连环��，���扛叽��ィ���ざ捞厍�����的颠倒重复序列，�区两侧有末端颠倒重复序���������，���馐且恢值湫偷腄型��肿咏峁埂；�蜃楹��个复制起点，分别位于�区左端的��和中部的��以及两个重复序列区，其在����、接完

5、成的【�縪该基因组含有�个阅读框，编码大约�多种蛋白质，目前已发现和命名的有�、�、�、�、�、�、�、�、�、�、�中糖蛋白�、�、�在免疫诱导方面起着非常重要的作用，成熟的病毒粒子大约含�种蛋白质【�】。完成了定位⋯】。�区被定位的基因有�种，其中常见的如�、�、�、胸苷激酶�����因之外。�区还有许多编码非结构蛋白的基因，这些基因的编码产物大多参与基因的调节、宿主细胞的裂解和病毒的包装、出芽、成熟等。例如，��牟�顳�与单纯疱疹病毒����矗�浔嗦氲挠��个氨基酸组成的病毒宿主关闭蛋白 �扬州火学硕十学位论文������

6、�����结构蛋白及其功能合，诱导动物机体产生依赖于补体和不依赖于补体的两种中和抗体，而且不同疱疹细胞培养筛选成为非必需糖蛋白。�与�均是疱疹病毒中以二聚体形式存在的微量糖蛋白，其中�保守性较强并可以介导病毒在小鼠神经系统内的传播；�与病毒的侵入及在细胞间的传播有关，且当缺乏�时，病毒粒子的感染力将大大 田瑞鹏：含单一��位点重组伪狂犬病毒的构建毒在细胞问的传播有关。�的作用和对毒力的影响目前还不甚明了，但肯定的一点是其与病毒的吸附、穿透以及细胞间的扩散无关。�与病毒的侵入有关，该蛋白与�以二硫键形成二聚体，且�对�于病毒粒子中

7、的存在起辅助作用。�諴�糖蛋白在诱导免疫应答方面均有着重要作用，通过构建猪伪狂犬病是危害养猪业的一种重要传染病。目前，国外防治该病主要采取隔离、检疫、淘汰猪群中隐性感染猪和预防接种等方法，但疫苗免疫接种仍然是防作用，但是它们免疫效力低且用量大甚至出现过敏反应，不能防止病毒在动物体内的复制和排出，并且有毒力返强和散毒的危险。因此，在对伪狂犬病病毒分子生物学深入研究的基础上构建了基因缺失疫苗、核酸疫苗及重组病毒疫苗等，这些都有利于减轻感染后的症状及散毒量，进而成为今后预防控制伪狂犬病的主要手段。因此灭活疫苗的免疫效果一般较差，并且灭

8、活疫苗使用剂量较大，易引发过敏反应，有的国家现已很少应用。��弱毒疫苗自然弱毒疫苗是在某些诱变剂的存在下，用高于通常的培养温度从非猪源细胞或鸡胚上反复继代获得的，其基因组内存在缺失和点突变，是一种天然的基因 扬州人学硕士学位论文产的�弱毒冻干疫苗【�����．�