乳酸菌调节的雏鸡呼吸道菌群变化及免疫调节作用研究

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1、分类号：S852.61+2单位代码：10193密级：公开学号：20130689专业硕士学位论文乳酸菌调节的雏鸡呼吸道菌群变化及免疫调节作用研究Chicksrespiratoryfloraandimmunomodulatoryeffectsoflacticacidbacteriaregulationstudies作者姓名：王迪学位类别：专业硕士专业名称：兽医硕士研究方向：动物微生态学指导教师：栾维民教授所在学院：动物科学技术学院2015年6月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我

2、所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林

3、农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日导师签名：签字日期：年月日摘要近年来，随着我国畜牧业的飞速发展以及人们生活水平的不断提高，微生态制剂也得到

4、了越来越为广泛的应用。乳酸菌是一类能够利用碳水化合物生成50%以上乳酸的革兰氏阳性菌。乳酸菌作为使用最广泛，效果最理想的益生菌，可以通过占位作用、产生抑菌物质等来抑制病原菌生长，还可以刺激机体免疫系统，提高机体免疫力，是最早应用于微生态制剂的菌种。目前已被公认为安全的食品级微生物应用于畜牧业和食品加工行业中。本试验将乳酸菌制作成细菌悬液，对雏鸡1~7日龄时进行喷雾，并在7日龄时免疫ND弱毒苗，研究其对雏鸡呼吸系统菌群多样性、雏鸡免疫功能以及对ND弱毒苗保护率的影响作用，明确乳酸菌与雏鸡呼吸道菌群多样性以及免疫机能的相关性，进而为

5、揭示乳酸菌与雏鸡呼吸道菌群及免疫机能的相互关系以及呼吸道益生菌在养鸡业中的应用提供理论依据。本试验选取600只一日龄健康非免疫海兰褐蛋鸡雏，随机分成四组，A组为对照组，正常饮水，饲喂基础日粮；B组为乳酸菌组，1~7日龄喷雾乳酸菌活菌，7日龄滴鼻点眼生理盐水；C组为ND弱毒疫苗组，1~7日龄喷雾生理盐水，7日龄滴鼻点眼ND弱毒疫苗；D组为乳酸菌+弱毒疫苗组，1~7日龄喷雾乳酸菌，7日龄滴鼻点眼免疫ND弱毒苗。试验期为42d。不同时间采集样本，研究乳酸菌对雏鸡呼吸道菌群多样性、雏鸡免疫功能及其对ND疫苗免疫保护影响作用。试验结果如下

6、：（1）通过PCR-DGGE结果显示乳酸菌对雏鸡呼吸道菌群多样性影响不明显，但是可以抑制呼吸道内的大肠杆菌的定殖；对7个差异明显的目的条带测序分别为4株假单胞菌属、1株大肠杆菌、1株Robinsoniellasp和1株不动杆菌。（2）间接ELISA试验结果表明，相对于对照组，1~7日龄雏鸡进行喷雾乳酸菌后于7日龄滴鼻点眼ND弱毒苗，血清、喉头洗脱液、气管洗脱液、肺脏洗脱液的IgA、IgG抗体水平均有不同水平的提高；石蜡切片HE染色结果表明，D组雏鸡假复层上皮内黏液泡状腺体数量明显高于其它组（P<0.05），A组假复层上皮较薄且泡

7、状腺体数量较少；A组雏鸡肺脏中淋巴组织较少，而相对于A组，B、C组雏鸡肺脏中的淋巴组织更为密集，D组雏鸡肺脏中的淋巴组织明显高于其他组，分布十分密集。乳酸菌能够增加雏鸡呼吸道内泡状黏液腺的分泌、增加上皮纤毛的黏附性，喷雾乳酸菌的雏鸡肺脏有较多的淋巴细胞识别抗原成分，从而增强了其抗NDV免疫能力。（3）攻毒试验结果表明，乳酸菌能够增强雏鸡呼吸系统的免疫功能，促进ND弱毒苗免疫效果，提高攻毒保护率。I以上结果表明，乳酸菌能够调节雏鸡呼吸道菌群多样性，对雏鸡呼吸系统免疫功能以及ND疫苗免疫保护率均有促进作用。关键词：乳酸菌，雏鸡，呼吸

8、道菌群，免疫功能，新城疫IIAbstractAsthemostwidelyusedandeffectiveprobiotics,lacticacidbacteriawhichcanproduceantimicrobialsubstancestoinhibitth