臭牡丹总黄酮对人肝癌细胞hepg2影响的实验研究

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1、分类号：学校代码：密级：学号：湖南中医药大学硕士学位论文臭牡丹总黄酮对人肝癌细胞影响的实验研究学科专业：中医内科学研究方向：中医药防治恶性肿瘤作者姓名：胡埼导师姓名、职称：朱克俭研究员学位类型：科学学位中国湖南长沙二零一五年四月原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研宄工作所取得的研宄成果。除文中特别加以标注引用的内容外，本论文中不包含任何他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南中医药大学或其他单位学位、证书而使用过的材料。与我共同对本研宂所作过重要贡献的单位及个人均已在论文中作了明确说明并致谢。作者签名：年；月》日关于学位论文

2、使用授权说明本人完全了解湖南中医药大学有关收集、保留及使用学位论文的规定，即：学校可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文；可以公布学位论文的全部或部分内容，允许学位论文被查阅和借阅；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文或通过国内有关权威机构收录论文全文，向社会提供信息服务。保密论文在解密后守此规定）中文摘要目的：探讨臭牡丹总黄酮对肝癌的作用及可能机制，为寻找有效的抗肝癌药物和治疗靶点提供实验依据。方法：体外培养细胞，以法检测不同浓度臭牡丹总黄酮作用于细胞后细胞的增殖情况；用倒置显微镜观察不同浓度臭牡丹总黄酮作用于细胞后细胞的形态学变化；流式细胞术检测臭牡丹

3、总黄酮对细胞凋亡的影响；法检测臭牡丹总黄酮作用于细胞后对、、表达的影响。从细胞水平、分子水平等不同角度研宄臭牡丹总黄酮对肝癌细胞的抑制作用，并探讨其作用机制。结果：实验结果显示：臭牡丹总黄酮药物浓度在、、、、时的抑制率分别为、、、与空白对照组比较均有显著性差异。，提示臭牡丹总黄酮有抑制肝癌细胞增殖的作用。细胞形态学观察：倒置显微镜下观察可见各浓度臭牡丹总黄酮组细胞形态发生改变，部分细胞变小变圆，胞浆量减少，浆内可见大量透明颗粒，细胞呈单个生长状态，贴壁能力下降，脱落增多，部分细胞呈悬浮生长。流式细胞术结果显示：随着臭牡丹总黄酮剂量的增加，细胞凋亡比例亦相应增加，提示臭

4、牡丹总黄酮可以促进细胞凋亡。结果显示不同剂量臭牡丹总黄酮作用下、、的表达均降低，与对照组相比具有显著性差异。结论：臭牡丹总黄酮能够抑制肝癌细胞生长和增殖，影响肝癌细胞形态和诱导其凋亡，能下调、、基因的表达，且作用呈浓度依赖性。臭牡丹总黄酮引起的肝癌细胞的增殖与凋亡的改变可能与调控信号通路并抑制其关键基因有关。关键词：臭牡丹总黄酮，肝癌，信号通路，凋亡。ABSTRACTObjective:ToinvestigatetheeffectsoftotalflavoneofClerodendronbungeiSteudonlivercancerandpossiblemechan

5、isms，，，，，，，，，，，，，，proportionofapoptoticcellsalsoincreasesaccordingly,promptsmellypeonytotalflavonoidscanpromotetheapoptosisofHepG2cells.4.PT-PCRresultsshowedthatundertheeffectofdifferentdosesofclerodendrumbungeitotalflavonoidsofbetacateninandTCF-4mRNAandCD44v6raRNAexpressiondecreased,co

6、mparedwiththecontrolgroupwithsignificantdifference.Conclusion:ClerodendrumbungeitotalflavonoidscaninhibitthegrowthandproliferationofHepG2cells,hepatocellularcarcinomaHepG2cellmorphologyandinduceditsapoptosis,candownregulatetheexpressionofbetacateninandTCF-4mRNAandCD44v6gene,andtheeffect

7、isconcentrationdependent.ClerodendrumbungeitotalflavonoidsinducedproliferationandapoptosisinHepG2hepatomacellschangemightberelatedtotheregulationofWnt/betacateninsignalingpathwayandinhibitthekeygenesrelatedto.Keywords:Clerodendrumbungeitotalflavonoids,livercancer,Wnt/P-catenins