survivin sirna纳米脂质体抗肝癌活性研究

《survivin sirna纳米脂质体抗肝癌活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、京碱和皆聲供中钟《化博±研究生学位论文臟北京协和医学院研究生院同等学力申请博±学位学校代码：１００２３．学号：ＺＢ２０Ｈ００１博击学位论文专业学位ＳｕｒｖｉｖｉｎｓｉＲＮＡ纳米脂质体抗肝癌活性研究所院：首都儿科研究所姓名：张朝霞指导教师；宋国维导师小组：宋国维王天有唐锁勤学科专业；儿科学研究方向：血液肿瘤学一完成日期：二零五年五月目录主要缩略词１技术路线２中文摘要３５英文摘要Ｍ７ｍ９第二

2、部分２４小结２８参考文献２９综述３２ａ谢４１原创性声明和授权使用４２说明主要缩略词ＤＭＳＯｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ二甲基亚讽ＦＢＳｆｅｔａｌｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍ胎牛血清ｍＭｍｍｏｌ／Ｌ毫摩尔／升ＰＢＳｐｈｏｓｐｈａｔｅＢｕｆｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ麟酸盐缓冲液ＰＩｐｒｏｐｉｄｉｕｍＩｏｄｉｄｅ规化丙晚ＲＮＡｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ核糖核酸－ｅｒｓｅａｎｍｅｒａｓｅｃｈａＲＴＰＣ艮ｒｅｖ

3、ｔｒｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｉｎ反转录聚合酶链式反应ｒｅａｃｔｉｏｎｓｉＲＮＡｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡ小干扰ＲＮＡＳＤＳｓｏｄｉｕｍｄｏｄｅｃｊｙｌｓｕｌｆａｔｅ十二焼基硫酸钢ＴＢＳ化－ｉｓｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅＴｒｉｓ盐缓冲液ＦＣＭ日ｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ流式细胞术ｃＤＮＡｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙＤＮＡ互补ＤＮＡ－－－－－－－－－－３４５－ｄ－－（ｉｍｅ也ｌｔｈｉａｚｏｌ２ｌ２，５ｄｉｈｅｎｌｔｅ３（４５二甲基２嚷嗤）２５，ｙｙ

4、）ｐｙ，，ＭＴＴｔｒａａｚｄｉｎｅｂｒｏｍｉｄｅ二苯基漠化四哇，喔嗤蓝－－ＧＡＰＤＨ－ｇＩｙｃｅｒａＩｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅ３麟酸甘油酸脱氨酶ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＩＡＰｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆａｏｐｔｏｓｉｓｒｏｔｅｉｎ觸亡抑制蛋白ｐｐＩ技术路线－ＲＮＡ体外合成ｓｉｕｒｖｉｖｉｎｓｉ又少脂质体包裹－－ｓｕｒｖｉｖｉｎｓｉＲＮＡ对肝癌细胞ｓｕｒｖｉｖｉｎｓｉＲＮＡ对肝癌移植瘤ＭＨＣＣ－９７Ｈ的体外作用的体巧作用移ＩＩ！Ｉ植舊辛

5、瘤瘤＾．Ｉ移１謂胞三－三植胞Ｓ细領Ｉ．ｋ穿爸胞覆＜磐重己５増．塑晏雪积ｓ＜？白？殖亡＞变５吕化％＆ＩＩＺ害白＾表表达１ＩＩ达２中文摘要实验目的本研巧主要探讨体外ｓｕｒｖｉｖｉｎ小分子干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）对人肝癌细胞－９７Ｈ。体内研究ＳｕｒｖｉｖｉｎｓｉＲＮＡ株ＭＨＣＣＳｕｒｖｉｖｉｎ基因表达及其增殖和调亡的影响对裸鼠肝癌种植瘤Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因表达Ｗ及帥瘤生长的影响。实验方

6、法体外实验通过设计、合成针对Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因序列特异性ＳｉＲＮＡ，用－Ａ转染ＭＨＣＣ９７Ｈ实验分为３组：ＳｕｒｖｉｖｉｎｓｉＲＮ脂质体包裹转染人肝癌细胞株，－）。组（ＳｕｒｓｉＲＮＡ组），无关ｓｉＲＮＡ转染组（ＮＣ组巧日无转染姐（正常对照组采用ＲＴ－ＰＣＲｔｔｍＲＮＡＭＴＴ比色法、Ｗｅｓｅｒｎｂｌｏ技术检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ及蛋白表达；嗟挫藍（）ｓｉ检测细胞增殖情况．５、２５．０、５０．０ｎｍｏｌ／Ｌ的ＲＮＡ作用于细胞；分别Ｗ终浓度为口后２４ｈ，采用流式细胞仪ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ双染法检测细胞调亡。

7、体内实验通过肝癌细胞株构建荷瘤鼠动物模型Ｓｕｒｖｉｖｉｎ，将脂质体包裹的ＳｉＲＮＡ经静脉注入裸鼠种植瘤体内，Ｗ无关ＳｉＲＮＡ为对照组，观察动物及瘤体的变－ｅｓｔｅｒｎｂｉｎＰＣＲ检测瘤组织ｓｕｒｖｉｖｉｎｍＲＮＡ水平ｌｏｔ检测瘤组织ｓｕｒｖｉｖ蛋化，Ｗ，ＲＴ白表达情况。－８ｈＳｕｒｓｉＲＮＡ组、ＮＣ组、正常对照实验结果体外实验结果显示：转染后４，组Ｓｕｒｖｉｖｉｎｒ．５５±０．１６、０．８５±０．２８、０．９３±０．４０，组间比较差ｒｌＲＮＡ表达水平分别为０＾＝＜－ＮＣ组（ｉ４１４。ＳｕｒｓｉＲＮＡ，

8、与、正常对照组比异有统计学意义，尸０．０１）组最低－＝－２０５６－３７＜ＲＮＡ４８ｈＳｉｓｕｒｖｉｖｉｎ（ｆ．１）。ｓｉ，较差异均有统计学意义．、２８．少均０００转染后±０±０、姐ｕｒｖｉｖｉ凸蛋白的相对表达量分别为〇．６