表阿霉素免疫纳米微粒靶向抗肝癌作用的研究

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1、表阿霉素免疫纳米微粒靶向抗肝癌作用的研究本文档格式为WORD,感谢你的阅读。最新最全的学术论文期刊文献年终总结年终报告工作总结个人总结述职报告实习报告单位总结演讲稿表阿霉素免疫纳米微粒靶向抗肝癌作用的研究　　如何在提高肿瘤组织药物浓度的同时降低正常组织中的药物浓度，是目前肿瘤化疗研究的热点，因此载药纳米微粒靶向治疗具有广阔的前景，下面是小编搜集整理的一篇探究表阿霉素免疫纳米微粒作用的，供大家阅读参考。[摘要]目的制备表阿霉素(E-ADM)免疫纳米微粒(NPs)，观察其对荷人肝癌裸鼠模型的靶向治疗效应。方法利用聚电解质复合法合成载表阿霉素纳米微粒(E-ADM-NPs)，化

2、学交联法合成载表阿霉素的抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)单克隆抗体纳米微粒(E-ADM-Ab-NPs)，观察E-ADM-Ab-NPs在荷人肝癌裸鼠模型体内的分布特点，观察药物的靶向抗肿瘤效应及其毒副作用。结果E-ADM-Ab-NPs保留了抗VEGFR2单克隆抗体的活性;E-ADM-Ab-NPs组肿瘤组织中的E-ADM浓度为(31.85plusmn;4.78)mg/kg，显著高于E-ADM-NPs组(Plt;0.05);E-ADM-Ab-NPs组的瘤体积抑制率及瘤重抑制率为60.69%和58.54%，较E-ADM-NPs组和E-ADM原药组均明显增强(Plt;0.

3、05);且E-ADM-Ab-NPs组的血白细胞计数、谷丙转氨酶及肌酐水平与空白对照组相比，差异均无统计学意义(Pgt;0.05);而E-ADM原药组的血白细胞计数较空白对照组下降42.68%，血清谷丙转氨酶水平则升高88.06%(Plt;0.05)。结论E-ADM-Ab-NPs具有免疫活性，其在动物模型体内呈导向性分布，可提高E-ADM的疗效并有效降低E-ADM的毒副作用，是一种安全的新型药物纳米靶向制剂。　　[关键词]表阿霉素;聚电解质复合法;载药纳米微粒;肝癌;血管内皮生长因子;靶向给药　　目前原发性肝癌的治疗是以手术为主的综合治疗，但总的手术切除率仅有20%～30

4、%，且术后2年复发率高达50%[1]，因此化疗依然是肝癌治疗重要的辅助手段。为提高传统化疗药物的疗效并减少其毒副作用，靶向给药日益成为治疗肝癌的有效方法，而单克隆抗体和载药纳米微粒则是当前研究的热点[2-4]。笔者在前期研究中选择生物相容性好、可生物降解的天然高分子材料海藻酸钠和阳离子瓜尔胶，利用聚电解质复合法制成具有良好缓释性能的载表阿霉素纳米微粒(E-ADM-NPs)[5]。本研究将进一步探讨E-ADM-NPs与抗VEGFR2单克隆抗体的交联，并观察交联物(E-ADM-Ab-NPs)对荷人肝癌裸鼠模型的抗肿瘤作用，以期用于原发性肝癌的靶向治疗。　　1材料与方法　　1

5、.1试剂与动物　　海藻酸钠(温州东升试剂厂);阳离子瓜尔胶(美国Economy公司);盐酸表阿霉素(法玛西亚有限公司);抗VEGFR2单克隆抗体(美国Biodesign公司);碳化二亚胺(EDC)(美国Pierce公司);人肝癌Bel7402细胞株(由中科院上海细胞生物研究所提供);三级BALB/c裸鼠(由中山大学医学动物实验中心提供)。　　1.2E-ADM-Ab-NPs的制备及抗体活性的检测　　依据文献方法[5]，利用聚电解质复合法制备E-ADM-NPs和未载药NPs。称取10mgE-ADM-NPs和2mg抗VEGFR2单抗溶于pH值7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中，

6、缓慢加入5mgEDC，4℃条件下搅拌2h而后静置过夜。将所得溶液离心后用蒸馏水洗涤3遍，冷冻干燥即可制得E-ADM-Ab-NPs。依法制备未载药Ab-NPs，[6]利用酶联免疫测定法(ELISA)对E-ADM-Ab-NPs和未载药Ab-NPs中抗VEGFR2单抗的活性进行检测。　　1.3荷人肝癌裸鼠模型的建立　　取对数生长期的人肝癌Bel7402细胞，用含15%小牛血清的PRMI1640培养液按1times;107/mL的浓度配成细胞悬液供皮下接种。取一定数量4～6周龄的三级BALB/c裸鼠，分别于右侧肩胛部皮下种植0.1mL细胞悬液，饲养2周后选择生长良好、皮下肿瘤直

7、径0.5～0.7cm的裸鼠用于肿瘤治疗试验，饲养6周后选择生长良好、皮下肿瘤直径约1.0～1.2cm的裸鼠用于药物的组织分布试验。　　1.4E-ADM-Ab-NPs在荷瘤裸鼠体内的分布　　取体重为(20plusmn;2)g/只的荷人肝癌裸鼠12只(雌雄各半)，随机分为E-ADM-Ab-NPs组和E-ADM-NPs组，两组按含E-ADM5mg/kg的剂量分别经尾静脉注射E-ADM-Ab-NPs及E-ADM-NPs。每只裸鼠给药后1h经眼静脉窦取血1.0mL作样品，然后断颈处死裸鼠，手术分别取出肿瘤、心脏、肝脏、肾脏等组织作样品。利用高效液相