共载阿霉素和egfr sirna的plga脑靶向纳米粒的制备及抗神经胶质瘤作用研究

《共载阿霉素和egfr sirna的plga脑靶向纳米粒的制备及抗神经胶质瘤作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterConstructionofPLGA—basedbraintargetednanoparticlesforCO-deliveryofdoxorubicinandsiRNAandtheirapplicationinanti—gliomatherapyByYongweiHaoSupervisor：Prof．YunZhangProf．ZhenzhongZhangPhD．LeiWangSchoolofPharm

2、ac6uticalSciencesMay2014原创性声明本人郑重声明：所成交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：张乙伟日期：kl咿{)6月}。日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属关IU'I'I大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家

3、有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文憾都匍脚日期：伽2中年D‘月[J日摘要药物的联合治疗是肿瘤治疗的新策略之一。阿霉素是一种传统的肿瘤化疗药物，但同时也是P．糖蛋白(P．gP)的底物，由于脑毛细血管内皮细胞表面也存在P—gP，非常

4、不利于阿霉素穿过血脑屏障治疗脑肿瘤。基因治疗是一种比较有希望的治疗手段。脑癌，肺癌，乳腺癌，头颈癌，肝癌等都过度表达表皮生长因子受体(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)。肿瘤EGFR的表达水平与肿瘤的等级程度，不良的预后和对放疗化疗的抗性等都有着密切的关系。本课题构建了一种共载阿霉素和EGFRsiRNA的靶向纳米粒递送系统，以期能够更好的治疗神经胶质瘤。课题的主要内容如下：1．ANG．CHI的合成与表征。通过3一马来酰亚胺丙酸-N一羟基琥珀酸亚胺酯(Pr—NHS—Mal)，将靶向

5、基团(angiopep一2)接载于壳聚糖上。采用傅里叶红外光谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)和BCA蛋白测定法分别对聚合物上的angiopep一2进行定性和定量表征，结果证实，angiopep．2成功接载于壳聚糖上。2．ANG／PLGA／DOx／siRNA靶向载药系统的构建。通过单因素考察，确定纳米粒制备处方，制备了ANG／PLG～，DOx纳米粒载药系统，并利用投射电镜(TEM)，纳米粒度和电位测定仪、紫外可见分光光度计对纳米粒的形态、粒径、电位、载药量、包封率、体外释放特征进行了表征。然后将其与荷负电荷的EG

6、FRsiRNA孵育，得到ANG／PLG～DOx／siRNA靶向载药系统，琼脂糖凝胶电泳显示EGFRsiRNA能够很好的荷载于纳米粒上。3．ANG／PLG～DOX／siRNA靶向载药系统对人脑星形胶质母细胞瘤U87MG细胞的抗肿瘤活性。使用苯磺罗丹明B(SRB)法考察了空白载体以及各种载药系统对U87MG细胞存活率的影响：使用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪考察了载药系统被U87细胞摄取情况，通过流式细胞仪分析载药系统对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果显示，共载系统比单独载药系统的抗肿瘤活性更为显著，作用4h后阿霉素和si

7、RNA能够有效的被U87MG细胞同时摄取，引起细胞凋亡。4．ANG／PLG加OX载药系统小鼠体内药物动力学和组织分布研究以及载药系统透过血脑屏障能力研究。体内药物动力学和组织分布研究显示，载药系统能够提高阿霉素的药时曲线下面积(AUC)，能够有效的递送药物进入脑部。第l页摘要本研究主要是制备了一种共载阿霉素和EGFRsiRNA的靶向纳米粒递送系统，并通过一系列实验指标考察了制剂的特征以及体外抗肿瘤活性，最后考察了载药系统的药物动力学和组织分布特征，证实了该系统能够递送阿霉素进入脑部，对神经胶质瘤治疗具有一定应用价值

8、。关键词：聚丙交酯．乙交酯共聚物，angiopep．2，siRNA，神经胶质瘤，纳米粒第1I页AbstractDrugcombinationther印yisoneofthenewstrategiesfortumortreatment．Doxorubicinisatraditionalchemotherapydrug，butalsothesubstrateof