青蒿琥酯纳米脂质体抗肝癌作用及其线粒体途径诱导凋亡机制的研究

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1、分类号R735.7学校代码10601密级公开编号Y0901021硕士学位论文青蒿琥酯纳米脂质体抗肝癌作用及其线粒体途径诱导凋亡机制的研究学科专业:病理学与病理生理学研究方向:肝癌的药物研究研究生姓名:金美华学号:Y0901021学位类型科学学位导师姓名:沈雪松教授二O一二年六月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证

2、书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编

3、学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日目录青蒿琥酯纳米脂质体抗肝癌作用及其线粒体途径诱导凋亡机制的研究…1中文摘要………………………………………………………………1ABSTRACT……………………………………………………………3英汉缩略词对照表………………………………………………

4、……………5前言……………………………………………………………………61材料与方法………………………………………………………91.1实验材料………………………………………………………………91.2主要实验试剂……………………………………………………………91.3主要实验仪器……………………………………………………………101.4实验方法……………………………………………………………112结果…………………………………………………………………202.1ART纳米脂质体的鉴定结果…………………………………202.2MTT法检测不同

5、浓度ART原料药和ART纳米脂质体对HepG2细胞的影响………………212.3倒置显微镜下观察细胞形态……………………………………………222.4Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态化……………………………222.5不同浓度ART原料药和ART纳米脂体对L-o2细胞的影响………232.6ART原料药和ART纳米脂质体对裸鼠肝癌皮下移植核瘤的影响……242.7采用RT-PCR技术检测细胞和组织中凋亡相关因子Apaf-1、caspas-9、caspas-3mRNA表达……………272.8裸鼠皮下移植瘤IHC染色caspas

6、e-3蛋白的表达………………………293讨论………………………………………………………………………313.1ART纳米脂质体的作用优势……………………………………………313.2线粒体途径诱导肝癌细胞凋亡是ART纳米脂质体抗肝癌的作用机制之一…………………………………323.3ART纳米脂质体对正常组织损伤小，且脂质体本身无毒副作用……323.4ART纳米脂质体抗肝癌作用强于ART原料药…………………………334结论…………………………………………………………………34参考文献………………………………………………………………3

7、5综述……………………………………………………………………………38攻读学位期间发表的学术论文目录…………………………………………47致谢……………………………………………………………………………48青蒿琥酯纳米脂质体抗肝癌作用及其线粒体途径诱导凋亡机制的研究中文摘要目的：对比研究ART纳米脂质体与ART原料药在体外培养肝癌细胞和人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型中的抗肝癌作用，及对凋亡基因表达的影响。为肝癌的临床治疗探索新的安全有效的药物制剂。方法：制备ART纳米脂质体；MTT法检测其对体外肝癌细胞的增殖抑制作用；用Hoechst33

8、258染色法观察细胞凋亡的形态学改变；建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察ART纳米脂质体的抑瘤作用；应用RT-PCR法检测药物处理后细胞和组织中凋亡因子Apaf-1、caspase-9、caspase-3mRNA的表达；免疫组织化学法检测凋亡因子caspase-3蛋白的表达。