msc及其exosome在胃炎癌微环境中的作用与机制研究

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1、Ｋ７３５．２公开密级：分类号；６１６编号１０２９９Ｂ１２１４００４ＵＤＣ：；？識巧掌ＪＩＴＹＩＡＮＧＳＵＵＮＩＶＥＲＳ博±学位论文ＤＯＣＴＯＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ◎ＭＳＣ及其ｅｘｏｓｏｍｅ在胃炎／癌论文题目：微环境中的作用与机制研究临床检验诊断学：学科专业作者姓名：指导教师：许文荣教授答辩２０１５年６月日期：分类号民７３５．２密级公开ＵＤＣ６１６编号１０２９９Ｂ１２１４００４拜荐乂掌博壬学位论

2、文ＭＳＣ及其ｅｘｏｓｏｍｅ在目炎／巧微环境中的作用与机制研究ＲＯＬＥＳＡＮＤＭＥＣＨＡＮＩＳＭＳＯＦＭＳＣＡＮＤＥＸＯＳＯＭＥＤＥＲＩＶＥＤＦＲＯＭＭＳＣＩＮＧＡＳＴＲＩＴＩＳ／ＧＡＳＴＲＩＣＣＡＮＣＥＲＭＩＣＲＯＥＮＶＩＲＯＮＭＥＮＴ作者姓名纪涧璧指导教师许文荣教授申请学位级别博：ｔ学科（专业）临床检验诊断学论文提交日期２０１５年４月论文答辩日期２０１５年６月学位授予单位和日期江苏大学答辩委员会主席陈宝安教授１基金资助：国家自然

3、科学基金（９１２９７１８８１２７２４８１），江苏省科技创新与成果转化项目（ＢＬ２０１２０５５）江苏省医学领军人才和科技创新团队计划（ＬＪ２０１１１７）江苏省高校优秀科技创新团队（ＳＪＫ２０－１）１３０独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下。，独立进行研究工作所取得的成果除文中己注明引用的内容Ｗ外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的

4、个人和集体。本人完全意，均己在文中Ｗ明确方式标明识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：年ｋ月日学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文楷，可采用影印、缩印或其他复制一手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向化会提供查询，授权中国学术期刊（光盘版）

5、电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》并向社会提供查询。。论文的公布（包括刊登）授权江苏大学研究生院办理本学位论文属于不保密Ｚｆ。Ｅ学位论文作者签名指导教师签名Ｉ於【？年ｔ月巧年ｔ月曰江苏大学博±学位论文摘要目的：本研究旨在探讨ＭＳＣ在胃炎微环境中的特性，ＭＳＣ如何重塑胃炎微环境，通过研究ＭＳＣ与炎症微环境的相互作用理解ＭＳＣ促非可控性炎症恶性转化的作用及与胃癌发生的关系；本研巧还将揭晓ＭＳＣ在胃癌微环境中的生物学功能及其参与重塑胃癌微；

6、将为胃癌的预防和治疗提供理论基础和实验依据环境的潜在机制。施（１）清洁级雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为２组，对照组正常饮食饮水，模型组采用含＇Ｉ＇Ｎ－－－－Ｎ－－－－－－甲基Ｎ硝基亚硝基脈（ＮｍｅｔｈｙｌＮｎｉｔｒｏＮｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ，ＭＮＮＧ）的水溶液配合高盐饲料喉养。影像学核磁共振成像观察大鼠胃部结构变化情况，采集不同时间点的血标本和组织标本通过血清学Ｌｕｍｉｎｅｘ液相芯片技术和沮织学切片染色动态观察大鼠胃炎恶性转化的情况－ＭＳＣ）。分离正常胃组织的ＭＳＣ（ＲＧＮ

7、和炎症微环境下的胃组－ＭＳＣ织ＭＳＣ（Ｒ別），通过细胞诱导分化染色，流式分析表面标记，干细胞相关指标检测等实验鉴定两者的多向分化潜能和自我更新能力。（２）乂用细胞生长曲线，平板克隆，细胞周期，ｔｒａｎｓｗｅｌｌ实验，Ｌｕｍｉｎｅｘ液相芯片等技术比较ＲＧＮ－ＭＳＣ和民ａ－ＭＳＣ的增殖速率，迁移率和炎性因子的分泌情况。民ＧＮ－ＭＳＣ民ＧＬＭＳＣＥＳ－ＴＨＰ－较和对正常胃上皮细胞ＧＩ和髓系单核细胞Ｉ迁移能为－的影响，检测ＧＥＳ１细胞ＥＭＴ相关指标的蛋白表达情况。（３）－ｅｘｏｓｏｍ

8、ｅ）分离获得ＭＳＣ来源的膜性囊泡（ＭＳＣ并进行鉴定，体外作用胃癌细胞株ＨＧＣ－２７。观察胃癌细胞的迁移和侵袭，检测ＥＭＴ相关指标的变化，并与正－１常胃上皮细胞ＧＥＳ进行比较，评价胃癌细胞是否发生ＥＭＴ。通过无血清培养基克隆－形成实验，Ｗｔｂｌｏｔ检，软琼脂克隆形成实验观察胃癌细胞体外成瘤的能力ｅｓｅｍ测干细－，评价胃癌细胞自我更新能力的变化胞相关蛋白表达情况。初步分析ＭＳＣｅｘｏｓｏｍｅ促进胃