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时间:2019-03-12
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1、授予笮位代码10089_学号成申请号20122305HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位KRT81及K丨AA0423和MicroRNA结合位点单核苷酸多态性与结肠癌发生的关系研究生:罗晓旭导师:张瑞星教授郭占军教授专业:内科学二级学院:第四医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权!0属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学
2、位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。>丨乡年孓月沾曰河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除丁文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果’指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰与’文责自负。目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英
3、文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7研究论文KRT8及KIAA0423和MicroRNA结合位点单核苷酸多态性与结肠癌发生的关系前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25
4、结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29综述MicroRNA与大肠癌相关研究现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46中文摘要KRT81及KIAA0423和MicroRNA结合位点单核苷酸多态性与结肠癌发生的关系摘要目的:MicroRNA(miRNA)是一类高度保守的小型非编码RNA,长度为22个核苷酸,在转录
5、后水平调控mRNA的表达。它通过与靶mRNA的3'非翻译区(3'untranslatedregion,3'UTR)序列按照碱基互补的原则结合,降解靶mRNA或抑制其翻译,从而实现对靶mRNA的负向调控。miRNA调控大约30%的蛋白编码基因,在分化、增殖、凋亡等细胞的生物学过程中发挥至关重要的作用。近年来越来越多的研究表明,某些miRNA在人类肿瘤细胞中出现异位表达,并且与多种肿瘤的发生及预后息息相关。单核苷酸多态性(Singlenucleotidepolymorphism,SNP)是指在基因组水平上由于单
6、个核苷酸的变异导致DNA序列的多样化,单核苷酸多态性的存在影响miRNA与其靶mRNA的互补结合,进而影响基因的表达。已有研究表明SNP位点的存在与肿瘤的易感性相关,然而关于miRNA结合位点的SNP与结肠癌(coloncancer)发病关系的研究有限。已有研究筛选出12个与肿瘤发生相关单核苷酸多态性位点,这些位点均为miRNA的结合位点,我们前期研究发现,其中六个多态性位点因低频率等位基因出现率小(<5%),不适宜进行分析,予以剔除,其余正在研六个位点中,已进行SET8基因上rs16917496位点的单核
7、苷酸多态性与结肠癌的关系的研究,因此本研究拟对KRT81(rs3660),RYR3(rs1044129),KIAA0423(rs1053667),C14orf101(rs4901706)及GOLGA7(rs11337)这五个多态性位点基因型进行分析,结合病例-对照研究,以期鉴定出与结肠癌发生相关的SNP位点,对筛查易患结肠癌的高危人群具有重要意义。方法:1标本采集:病例组的静脉血标本来自2006年7月至2008年9月间在河北医科大学第四医院外科行手术治疗的166名结肠癌患者,并且详细记录结肠癌患者的临床特征
8、(性别、年龄等),233例健康对照组的静脉血来自2011年10月至2012年5月期间在河北医科大学第四医院体检的健康人,健康对照组无与结肠癌相关的疾病。1中文摘要2基因组DNA的提取、目的片段的扩增及miRNA结合位点的单核苷酸多态性的筛查:用天根DNA纯化试剂盒提取血标本的基因组DNA,提取后置于4˚C冰箱保存备用。在NCBI数据库中查找上述5个miRNA结合的SNP位点对应的目的基因,设计PCR扩增上下游引物
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