eya4基因在食管鳞癌中的曱基化状态及其抑制食管鳞癌细胞侵袭转移的机制研究

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1、京碱和皆ｆ促博±研究生学位论文．纖Ｗ北京协巧医学院研究生院学校代码：１００２３学号：Ｂ２０１２００３０２３博±学位论文ＥＹＡ４基因在食管鱗癌中的甲基化状态及其抑制食管鱗癌细胞侵袭转移的机制硏究Ｅ－ｐｉｅｎｅｔｉｃｓｉｌｅｎｃｉｎｏｆＥＹＡ４ｉｎｄｕｃｅｓＥｉｔｈｅｌｉａｌｇｇｐＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＴｒａｎｓｉｔｉｏｎｉｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ所院：肿瘤医院姓名：罗玫指导教师：赫捷教授

2、导师小组：薛奇教授，吕志民教授，学科专业：肿瘤学研究方向：胸部肿瘤学完成日期：２０１５年４月北京协和臣学院中国医学科学院博±学位论文目录目录Ｓ录１表索引４Ｓ索引５中英文缩略词表７８摘要ＡＢＳＴＲＡＣＴ１０前言１２－、食管癌发病机制的研究进展１２二、－上皮间质转化在食管鱗癌中的研究进展１３Ｈ、ＥＹＡ基因家族在肿瘤中的研究进展１５实验娜１８一＞实验试剂１８二、主要仪器设备２１Ｈ、溶液配制２２实验方２３

3、一、食管鱗癌组织标本的收集２３二、食管鱗癌细胞系及其药物处理２３Ｓ、食管鱗癌姐织及细胞系中基因组ＤＮＡ及总ＲＮＡ的提取２５四、甲基化特异性ＰＣＲ及亚硫酸氨盐处理后测序２７－ＰＣＲＲＮＡ的表达五、ＲＴ半定量检测ｍ水平３２六、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测蛋白的表达水平３５韦、构建质粒％八、免疫巧光４２九、细胞功能学实验４３十、动物实验４９一巧十、统汁方法实验结果５４一ＥＹＡ４基因４、食管鱗癌组织和细胞系中存在异常的高甲基化５１．

4、１ＥＹＡ４基因在食管鱗癌组织中的甲基化情况５４１２ＥＹＡ４基因甲％．基化水平与食管鱗癌临床病理因素的巧关关系１３ＥＹＡ４基因在食管鱗癌细胞系中的甲基化情况訂１北京协和医学院中国医学科学院博±学位论文目录１４．食管鱗癌细胞系中ＥＹＡ４基因的表达水平５９－－１．５食管鱗癌细胞系经５ａｚａｄＣ处理后ＥＹＡ４基因启动子区甲基化情况的腳１６０！１．６食管鱗癌细胞系经药物诱导后ＥＹＡ４基因表达水平的检测６１二、在食管鱗癌细胞系中ＥＹＡ４基因功能的研究６２２．

5、１食管鱗癌细胞系中ＥＹＡ４基因的表达水平６２２．２ＥＹＡ４建立敲降和过表达的稳转细胞系拍２．３ＥＹＡ４对食管鱗癌细施的增殖没有明显影响６５２．４ＥＹＡ４能够抑制食管鱗癌细胞的侵袭和转移６８Ｈ、ＥＹＡ４在食管鱗癌细胞系中抑制ＥＭＴ的机制研宛７２３－１．ＲＴＰＣ民检测ＥＹＡ４基因表达水平改变后ＥＭＴ相关基因的表达水平７２３２ｗｔｅｒｎｌｏｔＥＹＡ４．ｅｓｂ检测食管鱗癌细胞系中表达水平改变后ＥＭＴ相关蛋白的表达水平７４３．３免疫巧光染色检测食管錢癌细胞系中ＥＹ

6、Ａ４基因敲降后ＥＭＴ相关蛋白的表达情况１５３．４ＥＹＡ４基因通过抑制ＡＫＴ／ＧＳＫ３Ｐ信号通路发挥抑制ＥＭＴ的作用．．．７７四、ＴＧＦ诱导ＥＹＡ４表达下调及其可能的机制７８－４．１ＴＧＦｐｌ诱导ＥＹＡ４ｍＲＮＡ表达水平下调７８４２ＴＧＦ－１ＥＹＡ４蛋白．Ｐ诱导表达水平下调的时间和浓度效应７９４－．３ＴＧＦｌＥＹＡ４ｍＲＮＡ和蛋白ｐ诱导表达水平下调的机制８０４－．４ＥＹＡ４ＴＧＦ在食管鱗癌细胞系中抑制ｐｌ诱导的ＥＭＴ８１４－．５ＥＹＡ４基ｉ诱导的ＥＭＴ

7、的机制因抑制ＴＧＦｐ８２五、在食管鱗癌细胞系中ＥＹＡ４基因能够促进ＤＮＡ损伤的修复８３５．１ＥＹＡ４基因能够促进顺巧诱导的ＤＮＡ损伤修复８３５．２ＥＹＡ４抑制食管鱗癌细胞系发生顺钻诱导的细胞调亡８４５３ＥＹＡ４ＤＮＡ．促进损伤修复的机制研巧８６论８８小结９３参考文献９４＊金獅９８在学期间发表论文％文献综述９９致谢１０６个人简历１０８２北京协和医学院中国医学科学院博±学位论文目录独创性声明１０９学位论文版权使用

8、授权书１０９３北京协和医学院中国医学科学院博±学位论文表索引表索引表１ＢＣＡ丰巧准品的配制３５５６２ｍｎ３６表２碌准品蛋白浓度与ＯＤ值的关系表３ｓｈＥＹＡ４及ｓｃｒａｍｂｌｅｓｈＲＮＡ序列３８表４ＥＹＡ４基因甲基化情况与５０对食管鱗癌患者临床资料么间的相关性分析５７表５食管鱗癌细施系不同处理组ＩＣ５０数值８４４北京协和医学院中国医学