mir-25在食管鳞癌中通过抑制cdh1的表达促进细胞的侵袭和转移

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1、博士学位论文学校代码：10023学号：B2009150miR．25在食管鳞癌中通过抑制CDHl的表达促进细胞的侵袭和转移miR--25PromotesCellMigrationandInvasioninEsophagealSquamousCellCarcinomabySuppressingCDH1Expression所院：姓名：指导教师：导师小组：学科专业：研究方向：完成日期：肿瘤医院肿瘤研究所徐晓慧赫捷教授孙克林教授，毛友生教授肿瘤学食管癌发病机制2012年5北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文目录脲㈣N17il表索引⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、1一北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文目录八、细胞功能实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．35九、质粒构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．37十、双荧光素酶报告基因实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43十一、CDHl回复实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45十二、miR．25基因拷贝数检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45十三、统计分析方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．47实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48一、miR．25在ESCC组织和ESCC细胞

3、系中的表达水平⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48二、miR-25在食管癌中的功能研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．52三、miR-25下游靶基因生物信息学预测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一56四、miR-25下游靶基因生物学实验验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．56讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．62结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．67参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．68基金资助⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．75已发表与学位论文相关的英文论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．76文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯77致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．101个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1032北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文表索弓表索引表1miR-25与食管癌患者各项临床指标的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．50表2siRNA与miRNA的区别⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．79北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文图索弓图索引图1miR

5、NA的成熟及主要作用方式⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．13图2miR．106b．25的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16图3E．钙粘素介导细胞间连接示意图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17图4pMIR-REPORTTM图谱⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37图5miR-25与CDHlmRNA3'-UTR结合位点示意图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38图6pGM—T图谱⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39图7pCMV6一ENTRY图谱⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．42图8miR．25在食管正常粘膜、不典型增

6、生及进展期食管癌的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯48图9miR．25在食管粘膜不典型增生及进展期食管癌的高表达比例⋯⋯⋯⋯⋯．．49图10miR-25的高表达与食管癌患者淋巴结转移及临床分期的关系⋯⋯⋯⋯⋯49图11五株食管癌细胞系中miR．25相对表达水平⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51图12miR-25基因拷贝数的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51图13miR．25对食管癌细胞增殖的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一52图14miR一25对食管癌细胞的细胞周期的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53图15miR．25对食管癌细胞凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯54图

7、16miR．25对食管癌细胞侵袭和迁移的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55图17miR-25在不同种属间CDHl3’UTR区的结合位点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯56图18miR．25对食管癌细胞中CDHl的表达调控⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．57图19双荧光素酶报告基因实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．58图20CDHl回复实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60图21miRNA的生成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯