盾壳霉产孢和生长相关基因的克隆及功能验证

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1、分类号华中农业大学博士学位论文密级盾壳霉产孢和生长相关基因的克隆及功能验证IDENTIFITIoNoFCONIDIATIoNANDGRoWTHASSOCIATEDGEN鼍s1淑CoNloTHYRIUMMINITANS博士研究生：魏玮指导教师：姜道宏教授学号：2009301010017指导小组：姜道宏教授李国庆教授黄俊斌教授付艳苹副教授程家森副教授专业：植物病理学研究方向：分子植物病理学获得学位名称：农学博士获得学位时间：华中农业大学植物科学与技术学院二O一三年月华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文石如需保密，解密时间年月日

2、是否保密IJ‘独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。研究生签名：锄’时间：矽侈年多月占日学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论

3、文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注：保密学位论文(印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密后适用于本授权书。’I／，学位论文作者鲐穆绎．糊鲐互重死签名日期：如侈年易月6日签名日期：知，弓年‘月<日盾壳霉产孢和生长相关基因的克隆及功能验证目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～iABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯iii缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯vi第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1植物病原真菌核盘菌的危害与菌核病的防治⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。11．1．1核盘菌及其危害⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1．2核盘菌的致病与侵染机理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1．3作物菌核病的防治⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．2生

5、防真菌盾壳霉研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31．2．1盾壳霉的生物学和生态学特性研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．2．2盾壳霉的生防机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．2．3盾壳霉的生防潜力及生产应用研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3真菌的分生孢子发育研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．71．3．1G蛋白相关信号途径参与调控真菌分生孢子的形成⋯⋯⋯⋯⋯81．3．2MAPK信号途径参与调控真菌分生孢子的形成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．3．3cAMP信号相关途径参与调控真菌分生孢子的形成⋯⋯⋯⋯⋯．91．3．

6、4其他参与调控真菌分生孢子形成的信号途径⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．101．3．5盾壳霉分生孢子发育的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．111．4蛋白质互作的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．4．1酵母双杂交⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一121．4．2双分子荧光互补⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．131．4．3免疫共沉淀⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．131．5论文的研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l3第二章构建盾壳霉T—DNA插入体库⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l5

7、2．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1．1盾壳霉菌株和培养条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．152．1．2菌株和载体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．152．1．3农杆菌介导转化盾壳霉⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．1．4DNA的抽提和Southern杂交⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172．1．5反向PCR克隆T—DNA插入破坏的基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．172．2结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．2．1表型异常突变体的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯．182．2．2Southern杂交验证T—DNA插入的拷贝数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18华中农业大学2013届博士研究生学位论文2．2．3反向PCR克隆T．DNA插入侧端的核苷酸序列⋯⋯⋯⋯⋯⋯．192