肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用

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1、Inductioneffectofhepatocytegrowthfactorandinsulin—-likegrowthfactoroncardiacstemcellsAThesisSubmiRedfortheDegreeofMasterCandidate：ZhuBeibeiSupervisor：Prof．SunYinpingSchoolofBasicMedicalScienceXinxiangMedicalUniversity新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特

2、别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：料荡日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：

3、1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密口。作者签名：导师签名：拳荔荔飘．．狼军日期：年月日日期：年月日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(1)Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(3)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(5)日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(5)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(7)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(12)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(14)，J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(18)附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(19)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(25)综述：心肌干细胞与心肌修复⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(29)附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(44)攻读硕士学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(45)致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(46)个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(47)新乡医学院硕士学位论文肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用摘要j匕垦月京心肌梗死严重危害人类健康，干细胞治疗心肌梗死成为目前的研究热点【¨，心肌干细胞(cardiacstemcells，CSCs)存在于胚胎和成体心脏组织内，具有典型的干细胞特性，即克隆性、自我更新与多向分化，在特定诱导条件下可以定向分化为血管平滑肌细胞、内皮细胞及心肌细胞。生长因子能有

6、效地动员干细胞，增强干细胞黏附力与增殖力，研究表明肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGFl)能够诱导多种干细胞向心肌细胞分化，但其对心肌干细胞的作用报道甚少，本实验就此问题进行研究和探讨。目的探讨在体外，HGF和IGFl能否诱导心肌干细胞增殖并定向分化为心肌细胞，为临床应用心肌干细胞治疗心肌梗死提供必要的理论依据。方法采用改进的组织贴块法培养心肌干细胞，酶消化法原代培养心肌细胞(Mycardialcells，MC)，免疫荧光技术鉴定心肌干细胞特异性表面标志物c．kit及血源性干细胞表面标志物CD34，流式细胞仪分选纯化得到c．k

7、it+心肌干细胞，CFDASE绿色荧光探针示踪培养，检测心肌干细胞的增殖情况。实验分组：1．单纯心肌干细胞组：分为四组，①对照组：心肌干细胞，不添加生长因子；(窑)IGFl组：CSCs+100p．g／LIGFl；(③HGF组：CSCs+20肛g／LHGF；(垄)HGF+IGFl组：CSCs+20Itg／LHGF+100肛g／LIGFl。2．心肌干细胞与心肌细胞共培养组：分为四组，①对照组：CSCs+MC，不添加生长因子；(至)IGFl组：MC+CSCs+100I．tg／LIGFl；@HGF组：MC+CSCs+20肛g／LHGF；@HGF+IG

8、Fl组：MC+CSCs+20I，tg／LHGF+1001．tg／LIGFl。倒置显微镜观察细胞不同时期数量与形态的变化，活细胞工作站观察CFDASE示踪剂荧光强弱，