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《细胞因子信号传导抑制蛋白-1 对白介素-1β 诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国细胞生物学学报ChineseJournalofCellBiology2012,34(1):41–48http://www.cjcb.org细胞因子信号传导抑制蛋白-1对白介素-1β诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响刘青娟1 邢玲玲2 李建英3 郝 军1 刘 巍1 王 品4 刘淑霞1*12(河北医科大学病理教研室,石家庄050017;河北医科大学附属第二医院肾内科,石家庄050000;34河北省石家庄市人民医院皮肤科,石家庄050000;河北现代女子医院,石家庄050000)摘要为研究细胞因子信号
2、传导抑制蛋白-1(suppressorsofcytokinesignaling-1,SOCS-1)对白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响,构建了稳定表达SOCS-1的人肾近曲小管上皮细胞(HKC)。用IL-1β(10ng/mL)刺激48h后,用Westernblot、酶联免疫吸附和RT-PCR方法分析显示:IL-1β刺激使不转染的细胞和转染空载体的细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin1,α-SMA)和磷酸化信号转导及转
3、录激活因子1(phospho-signaltransducersandactivatorsoftranscription1,p-STAT1)表达增加,Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的分泌增加,而细胞角蛋白18(cytokeratin18,CK18)的表达减少。SOCS-1过表达能抑制IL-1β刺激引起的α-SMA和p-STAT1的表达,减少ColⅠ和FN的分泌,同时能够部分恢复IL-1β刺激引起的CK18的表达。可见,SOCS-1过表达能抑制I
4、L-1β诱导的肾小管上皮细胞转分化,此过程可能与STAT1的磷酸化受抑有关。关键词细胞因子信号传导抑制蛋白-1;白介素-1β;肾小管上皮细胞;转分化各种原因所致的慢性肾脏疾病发展至晚期的signaling,SOCS)是一类细胞信号传导过程的负调控最终结果是肾功能衰竭,其形态学改变的实质是肾因子,包括八种家族成员(CIS、SOCS-1~7),SOCS对[6]脏纤维化和硬化。肾脏纤维化分为肾小球硬化和肾JAK/STAT信号通路的负调控作用已被肯定。本实小管间质纤维化(tubularinterstitia
5、lfibrosis,TIF)两个验采用IL-1β诱导肾小管上皮细胞转分化,利用体外方面。最初认为肾小球的病变是肾功能下降的主要质粒转染技术观察SOCS-1基因转染对IL-1β诱导的原因,但之后逐渐认识到TIF的进展与肾功能的下降肾小管上皮细胞表型转化的影响。[1]关系更为密切。细胞外基质的过度积聚是TIF的主要病理学变化,而肌成纤维细胞是TIF发生发展过1材料与方法程中产生细胞外基质的主要细胞,在TIF中发挥着重1.1材料[2]要作用。有关肌成纤维细胞的来源,有研究表明,人肾近曲小管上皮细胞株由中国
6、人民解放军间质中约36%的肌成纤维细胞来自于肾小管上皮细总医院肾内科陈香美教授惠赠,p-CR3.1/SOCS-1表胞转分化,即肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化达载体由德国慕尼黑大学ChristophJ.Auernhammer(tubularepithelialmyofibroblasttransdifferentiation,教授惠赠。鼠抗CK18单克隆抗体购自北京博奥森TEMT)。因此,抑制TEMT有利于延缓TIF的进展。生物技术有限公司,兔抗α-SMA、SOCS-1多克隆诱导肾小管上皮细胞转化为
7、肌成纤维细胞的抗体购自美国Abcam公司,p-STAT1多克隆抗体购因素很多,包括高糖、血管紧张素II、糖基化终末自SantaCruz公司,IL-1β购自Peprotech公司,脂质体产物及多种炎症细胞因子,比如肿瘤坏死因子-α、2000、pCR3.1质粒载体购自Invitrogen公司,二步法[3-5]白介素-1β(IL-1β)、抑瘤素M等,这些因素都可以通过激活JAK/STAT信号通路发挥作用。由此考收稿日期:2011-07-18接受日期:2011-09-21河北省自然科学基金(No.C2009
8、001083)和河北省卫生厅医学科学虑阻断该通路可以抑制多种因素诱导的TEMT。细研究重点课题(No.20090056)资助项目胞因子信号传导抑制蛋白(suppressorsofcytokine*通讯作者。Tel:0311-86265734,E-mail:susanliu1976@163.com42·研究论文·免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥公司,ColⅠ和FNGGACCCGGT-3’,5’-CCAGCTGCCGACGGA的ELISA试剂盒为美国R&D公司产品。GGTT
