il-2与il-7基因对犬细小病毒vp2 dna疫苗的协同免疫增强作用

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1、分类号：Q2墨密级：公珏单位代码：!QQ墨鱼学号：2Q!鳢丝IL．2与IL．7基因对犬细小病毒VP2DNA疫苗的协同免疫增强作用EffectsofcanineIL--2andIL—-7genesonenhancingimmunogenicityofcanineparvovirusVP2genevaccineinmice学位申请人：陈慧慧指导教师：仲飞教授学科专业：基础兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二O一三年五月二十九日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。．据我所知，除了文中特别加以标注和

2、致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑丝盔些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：甬巷慧签字日期：加；年f月；1日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑羔垦壅些盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阕和借阅。本人授权亟韭盔些盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在

3、解密后适用本授权书)学位论文作者签名：话巷苒签字日期；洳f3年箩月≥1日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：导师签名：碱怎l签字日期：≯o13年岁月≥1日电话：邮编：摘要犬细小病毒病是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。目前对该病尚无有效的治疗药物，主要通过接种弱毒疫苗进行预防。但接种弱毒疫苗后易出现亚临床感染或弱毒苗毒力返强等现象，近年来，DNA疫苗受到国内外学者的广泛关注，因为它既可以诱导体液免疫应答又可以诱导细胞免疫应答。然而DNA疫苗的免疫水平相对比较低，选择适当的DNA疫苗佐剂来加强DNA疫苗的免疫原性具有非常重要的意义。细胞因子表达载体作为

4、DNA疫苗佐剂，因具有释放缓慢、作用时间持久和佐剂作用强等特点而被广泛应用。IL．2作为生物佐剂已被广泛应用于DNA疫苗和亚单位疫苗的研究。近年来，IL一7被认为是一种潜在的细胞因子生物佐剂，本实验室曾经用clL．7作为CPVVP2的免疫佐剂免疫小鼠，证实clL．7对免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫都有明显的促进作用。为了解clL．7与clL．2在增强DNA疫苗免疫原性中是否有协同作用，本实验利用CPVVP2DNA疫苗对其进行了初步分析。本实验利用含内部核蛋白体进入位点(IRES)的真核表达载体构建clL．2矛IclL．7双基因表达载体。然后利用本实验室构建的CP

5、VVP2、clL．2和clL．7表达载体及本实验构建的双基因表达载体，以不同组合对小鼠进行免疫，I口VP2单免疫，VP2+clL．2、VP2+clL．7和VP2+clL．2／clL．7共免疫。通过ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清VP2的抗体水平，并分析中和抗体的效价，通过细胞增殖实验检测免疫后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应，并用ELISA方法测定小鼠淋巴细胞Y干扰素的表达水平。结果表明，本实验构建的双基因表达载体结构正确，并能够介导clL．2与clL．7基因在真核细胞中进行同步分泌表达。小鼠免疫结果表明，VP2+clL．2／clL．7共免疫组小鼠血清的抗体

6、滴度和中和抗体效价均显著高于VP2+clL．2和VP2+clL．7共免疫组(P

7、lrUSVrZ2eneVacclnelnmice···一●一’1n■^●Author：ChenHuihuiMajor：BasicVeterinaryMedicineSupervisor：Prof．ZhongFeiAbstractCanineparvovirus(CPV)diseaseisoneofthemostinfectiousdiseasesthreateningcanineindustry．Atpresenttime，thereisnoeffectivedrugforitstreatments．Thepreventionforthisdiseasewas

8、mainlyconductedbyva