应用原生质体融合技术选育克拉维酸高产菌株

《应用原生质体融合技术选育克拉维酸高产菌株》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、维普资讯http://www.cqvip.com第23卷第3期天津科技大学学报Vl01．23No．3Sep．20082008年9月JournalofTianjinUniversityofScience＆Technology应用原生质体融合技术选育克拉维酸吉同1立菌株张阳，张恺，郭金体，王艳萍(天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津300457)摘要：采用棒状链霉菌种内原生质体融合技术，选育克拉维酸高产菌株．该实验选用舒巴坦钠耐受性高产菌株StreptDvcclavuligerusB71-3—10

2、和甘油耐受性高产菌株StreptomycesclavuligerusB71—14为亲株，优化了原生质体制备条件和融合条件，最终得到遗传稳定性良好的融合子F14．该融合子的克拉维酸产量提高到650．35mg／L，分别比亲株S．czavuligeruB71—3—10和．clavuligerusB17—14的克拉维酸产量高36．77％和20．84％．将原生质体融合技术应用到棒状链霉菌克拉维酸高产菌株的选育中，证明了其可行性、高效性及成效显著性．关键词：棒状链霉菌；克拉维酸高产菌株；原生质体融合中图分类号

3、：Q813．2文献标识码：A文章编号：1672—6510(2008)03—0021—05BreedingofClavulanicAcidHigh—ProductionStrainbyUsingProtoplastFusionTechniqueZHANGYang，ZHANGKai，GOUJin—ti，WANGYan—ping(CollegeofFoodEngineeringandBiotechnology，TianjinUniversityofScience＆Technology，Tianjin30

4、0457，China)Abstract：Breedingtheclavulanicacidhigh—productionstrainofStreptomycesclavuligerusbyusinginterspecificprotoplastfusiontechniquewasstudied．Inthisstudy，sulbactamsodiumresistanthigh—productionmutantS．clavuligerusB71—3—10andglycerinresistanthigh

5、—productionmutantS．clavuligerusB71—14obtainedbythelabintheprophaseresearchwerechosenastheparentalstrains．Aftertheoptimizationoftheprotoplastformationandfusionconditions，ageneticallystablefusantF14withhigherclavulanicacidproductionof650．35mg／Lwasobtain

6、edfinally．Theclavulanicacidproductionofthefusantwas36．77％and20．84％higherthantheparentalstrainS．clavuligerusB71—3—10andS．clavuligerusB71—14，respectively．Theresultsshowsthatusingprotoplastfusiontechniqueinthebreedingofclavulanicacidhigh—productionstrain

7、ofStreptomycesclavuligerusisfeasible，eficientandprominent．Keywords：Streptomycesclavuligerus；clavulanicacidhigh—productionstrain；protoplastfusion克拉维酸是棒状链霉菌产生的天然一内酰胺类第一个具有临床价值的一内酰胺酶抑制剂克拉维酸抗生素，它本身的抗菌活性很弱，但它不论在体外或(clavlanicacid，简称CA，又称棒酸)t21．至今，在临体内都能同耐药的

8、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌所床上使用的奥格门汀(Augmentin)、泰门汀(Timen．产生的一内酰胺酶生成牢固不可逆的结合物，从而tin)等克拉维酸与阿莫西林等的联合制剂每年具有数抑制耐药性细菌对一内酰胺类抗生素的分解作用，十亿美元的销售额．但目前国内克拉维酸发酵效价恢复青霉素类及头孢菌素类抗生素对许多产生一内并不高，因而产量低，成本高．为了提高克拉维酸的酰胺酶的耐药菌的抗菌活性【JJ．生产水平，降低生产成本，满足国内克拉维酸的原料1976年，英国Beecham公司Brown首