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《园艺植物原生质体培养及应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、5%%’,年’月第5’卷第5期!"#1233$!"#$%&%’()*$+,(-.*(/#!+,+0*#!),.)*%45678$9$57%,,,,,,园艺植物原生质体培养及应用!赵维峰*:,54;孙光明54,,*4)4*4李绍鹏,,杨小环,,李茂富!&华南热带农业大学园艺学院海南儋州’(&()(*%中国热带农业科学院南亚热带作物研究所广东湛江’%$+,&-)山西农业大学农学院山西太谷+)+.+&摘要综述了园艺植物原生质体培养的材料来源及预处理方法!原生质体的分离与培养及其应用$关键词园艺植物"原生质体"分离"培养分类号<)’)=+,">?
2、228888原生质体7"#/0/"12304一词!*22%年由!""原生质体培养的材料来源及预处理@ABCDEFB最早提出!是指&通过质壁分离!可进行原生质体培养的材料非常广泛!能够和细胞壁分开的那部分物质’$早期!如自然条件下生长的植物细胞!无菌幼苗的人们采用机械分离法分离原生质体!进行原胚根及子叶和胚轴细胞!外植体来源的愈伤生质体培养研究"但由于这种分离方法操作组织(体细胞胚(悬浮细胞等$其中!研究烦琐(产量低!取材又局限于高度液泡化的比较多的是叶肉细胞(愈伤组织和细胞悬浮细胞!从而使这一领域的研究进展缓慢$培养物$*0+&年!英国G
3、HDFBIJAK大学的LMNAOM,P=,在叶肉细胞的研究中!通常是把叶片切PHQRFBI首次从疣胞漆斑菌7!"#$%&’()*+成条块后直接用酶处理!以游离原生质体$,’--./-)/4分离得到纤维素酶!并用它分离出采用这种方法!有可能获得大量的(质量较番茄幼根原生质体!为植物原生质体培养拓一致的原生质体$不同叶龄的原生质体产量宽了道路$此后!人们不断探索原生质体的有较大的差异!以苗龄*9W59#M(刚平展的分离和培养条件!为原生质体培养积累了丰幼叶最佳$因试管苗生长条件易控制!其叶富的经验$?01%年!日本的GAIADA和片生长受季节
4、影响小!本身无菌!使用方便!SARETE首次对烟草叶片的原生质体进行培已为大多数人所采用$苹果(梨(草莓(李养!并获再生植株U?V子(猕猴桃(樱桃等!均是以叶肉为材料进$从此!该领域进入到迅速发展的阶段$行原生质体培养!并获得再生植株的$>XYX#ZQJADD等的试验证明!用西洋梨试管苗叶!收稿日期"#$%&’(&)(*+,,,责任编辑-,曾莉娟.赵维峰/*01234!男!山西太谷人"在读硕士研究生!研究方向##果树学$联系地址%海南省儋州市华南热带农业大学5&&5级研究生+&’6"电话%7%20245))%8’591-*)*,0205,
5、0*0+$(’2(赵维峰等园艺植物原生质体培养及应用片分离原生质体!产量要比大田植株的高出是果胶酶和纤维素酶"在进行愈伤组织#细!"!#胞悬浮及幼根组织等培养时!常常还需加入倍"潘增光等报道!利用苹果无菌试管苗进行原生质体培养!可获得再生植株"$#半纤维素酶"D#""用低浓度:()7EBC;的果胶酶以悬浮培养物和愈伤组织为材料!进行8FGH@AIJKF7L=!/游离苹果#梨的叶肉原生原生质体培养!有利于承受酶的作用!并且质体!具有很好的效果"M#"这说明!果胶酶原生质体的产量高"柑桔类原生质体技术获中的果胶裂解酶!对叶肉原生质体的分离有得
6、成功的重要因素之一就在于此"%#明显促进作用"酶制剂的用量随酶活性高低"草莓茎端的愈伤组织继代培养&个月而异!参考浓度值在’N/)+EBC之间"但酶后!游离得到的原生质体产量高#活力强#活性很高的果胶酶L=&/!用量一般在)>’O状态好"’#(>)+EBC"苹果花粉愈伤组织继代培养()*之间"酶混合液与材料鲜重的比例(’+,的原生质体产量与活力均比继代培养可参照()P(:即(+E鲜重材料用()+?C酶液;"同(-./)+,的强"种果树的同类材料!原生质体的分离会受品许多研究表明!进行适当的预处理!可种#品系或细胞系的影响而不同"因此!应以
7、提高原生质体产量和代谢活力"如对母体根据各特定的愈伤组织确定适宜的酶组合"植株进行轻度的干旱处理或(/0+甘露醇处!&$&!++酶解时间理$逐步降低培养植物细胞的水势!增强原酶解时间对于原生质体分离的影响也极生质体对培养基高渗透压的耐受力!使游离其明显"对于某个特定的植物材料来说!建原生质体能更好地适应新的培养条件"一般立适宜的酶解浓度Q时间组合!是获得高产预处理的方法有%1预培养法!如羽衣甘优质原生质体的重要条件"如枣树细胞悬浮蓝预培养2+,后!再进行原生质体的分离!培养体系%()+EBC纤维素酶R(+EBC离析酶其产量虽低于对照!但培
8、养时细胞分裂频率组成的混合酶液!酶解最佳时间为(-+4$过显著提高!并很快形成能生根的愈伤组织$长则使原生质体破裂!过短则产量不够"()#"3暗处理法!如生长旺盛的甘蔗植株暗处在草莓花药愈伤组
