维拉帕米对肝星状细胞增殖的抑制作用

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1、泸州医学院学报2010年第33卷第1期JournalofLuzhouMedicalCortegeVo1．33No．1201015赣维拉帕米对肝星状细胞增殖的抑制作用任美萍，李万平，李蓉，刘明华，肖顺汉，李茂(泸州医学院药学院：药理毒理研究室；药理学教研室，四川泸州646000)摘要目的：观察维拉帕米对体外培养的人肝星状细胞(hepaticstellateceHs，HSCs)增殖的影响。方法：用不同浓度的维拉帕米对HSCs进行处理，CCK一8试剂盒(CellCountingKit一8)检测细胞增殖抑制率，HE染色观察细胞形态超微结构的变化。结

2、果：维拉帕米可抑制HSCs的增殖，且有剂量相关性，其Ic值为0．15+0．01p~mol／ml；HE染色可见维拉帕米组出现不同程度的细胞体积变小、核浓缩深染等凋亡形态改变。结论：维拉帕米可抑制HSCs的活化增殖，诱导其凋亡。关键词维拉帕米；肝星状细胞；肝硬化中图分类号R961．5文献标识码A文章编号1000-2669(2010)1—0015—03THEEFFECToFVERAPAMILoNPRoLⅡERATIoNoFHEPATICSTELLATECELLSRenMeiping，etalLaboratoryofPharmacologyandT

3、oxicology,LuzhouMedico]CoAbstract0bjective：ToobservetheeffectofVerapamilonproliferationofhumanHSCs．Methods：HSCswereincubatedwithdifferentconcentrationofVerapamil，cellproliferationwasassessedbyCellCountingKit一8，morphologicchangewasdetectedbyHEstaining．Results：Verapamilcanin

4、hibittheproliferationofHSCsinadose—dependentmanner，theIC50valuewas0．15~0．011xmol／ml，HEstainingshowedvariouschangesofcellapop-tosissuchasshrinking，pyknosisandhyperchromaticchange，andSOon．Conclusion：VerapamilcaninhibittheproliferationofHSCsandinducetheirapoptosis．KeywordsVer

5、apamil；Hepaticstellatecells；Hepatocirrhosis肝纤维化(hepaticfibrosis，HF)是多种原因所致1材料与仪器的肝损伤向肝硬化发展过程中的病理过程和必经阶段，现已知HF是一个可逆性的病变，而肝硬化是不1．1药品与试剂可逆的ll1。因此，抑制肝纤维化的发展或逆转肝纤维盐酸维拉帕米片：天津市中央药业有限公司，批化，对慢性肝炎、肝硬化的治疗具有重大意义。肝星号：090101；DMEM／HIGHGLUCOSE：赛默飞世尔生状细胞(HSCs)的活化增殖及凋亡减少在肝纤维化物化学制品(北京)有限公司，批

6、号：NUB0146；胰蛋过程中起关键作用闭，抑制HSCs的活化增殖和诱导白酶：美国Sigma公司；胎牛血清：天津灏洋生物制其凋亡是防治肝纤维化、肝硬化的重要策略之一。研品科技责任有限公司；CCK-8(CellCountingKit-8)试究发现维拉帕米有保护大鼠肝细胞、抑制肝纤维化剂盒：碧云天生物技术研究所；4％多聚甲醛固定液：形成、降低肝硬化程度的作用，但目前尚未见维拉帕博士德生物工程有限公司，批号：20070308；苏木精米对体外培养的HSCs作用的相关报道。本研究以染液、伊红染液、二甲苯由泸州医学院附属医院病理体外培养的肝星状细胞为研

7、究对象，采用CCK一8试科实验室提供。剂盒检测维拉帕米对肝星状细胞增殖的抑制作用。1_2细胞株肝星状细胞株HSCs引自泸州医学院附属医院基金项目：四川省卫生厅科学研究项目(No2006437)传染与免疫实验室，采用含10％胎牛血清的DMEM作者简介：任美萍(1978一)，女，助教，硕士生pH7．2～7．4的完全培养基，在37℃、5％C02条件下常泸州医学院学报2010年第33卷第l期16JournalofLuzhouMedicalCoUegeVo1．33No．12010规培养。计算半数抑制浓度(IC卯)。13仪器2．4HE染色观察细胞形态变

8、化酶标分析仪：北京普朗新技术有限公司，型号：取对数生长期的HSCs，0．25％胰酶制成单细胞DNM-9602；倒置相差显微镜：13本Olympus公司，型悬液，细胞浓度为lxl0