氟非尼酮对大鼠肝星状细胞增殖作用的观察

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1、分类号UDC硕士学位论文密级氟非尼酮对大鼠肝星状细胞增殖作用的观察ObservationoftheeffectofFluorofenidoneonrathepaticstellatecellproliferation作者姓名：黄家明学科专业：内科学学院(系、所)：湘雅医院指导教师：阳惠湘教授论文答辩日期芝：±：兰塑答辩委员会主席中南大学二0一二年五月厂z原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。

2、与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：日期：』生年』月毕曰学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。⋯轹坳聊签严飙一』秘硕士学位论文中文摘要机制摘要目的：观察AKF—PD对大鼠肝星状细胞增殖的影响，初步探讨其方法：1．原位灌流法从S—D大鼠肝脏内分离

3、原代大鼠肝星状细胞。2．分离培养14天的原代肝星状细胞分为：正常组、模型组(1Ong／mlPDGF)、200lag／m1AKF—PD治疗组(1Ong／m1PDGF+200ug／m1AKF—PD)、400ug／mlAKF—PD治疗组(1Ong／mlPDGF+400lag／m1AKF—PD)，药物预处理24小时后加入PDGFIOng／ml继续培养24小时，MTT法检测AKF—PD对大鼠肝星状细胞增殖的影响。3．将分离培养14天的原代肝星状细胞分为正常组、模型组(1Ong／m1PDGF)、AKF—PD治疗组(1Ong／mlPDGF+400lag／mlAKF—PD)、PFD治疗组(10ng／mlP

4、DGF+400ug／mlPFD)。药物预处理24小时后加入PDGFIOng／ml继续培养24小时，提取细胞蛋白，WesernBlot法检测CyclinDl、CyclinE、P27n以蛋白表达。结果：1．与正常组比较，模型组肝星状细胞吸光度值显著增加；与模型组比较，不同浓度的AKF—PD治疗组肝星状细胞吸光度值均明显下降，且400ug／mlAKF—PD治疗组较200IJ-g／mlAKF—PD治疗组下降明显。2．与正常组比较，模型组肝星状细胞CyclinDl、CyclinE表达明硕士学位论文中文摘要显增加，P27肼州表达明显降低；与模型组比较，AKF—PD治疗组CyclinDl、CyclinE

5、表达显著降低，P27¨以表达显著升高。结论：1．AKF—PD显著抑制大鼠肝星状细胞增殖。2．AKF—PD可能是通过下调CyclinDl、CyclinE表达和上调P27聃州表达抑制大鼠肝星状细胞增殖。关键词肝纤维化，肝星状细胞，AKF-PD，PDGF，细胞增殖ObjectiveABSTRACTToinvestigatetheeffectoffluorofenidoneontheproliferationofrathepaticstellatecellanditsmechanism．Method1．primarystellatecellswereisolatedfromliversofS-Dr

6、atsbyperfusionwithpronaseandcollagenase．2．Afterisolatedandculturedfor14days，cellsweredividedintofourgroups：normalgroup、modelgroup(10ng／mlPDGFstimulation)、200}tg／mlAKF—PDtreatmentgroupand400lxg／mlAKF_PDtreatmentgroup．Cellswerepretreatedwithdrugsfor24hoursbeforestimulationwithPDGF(10ng／m1)for24hours

7、．MTTassaywasusedtoobservetheeffectofAKF-PDonHSCproliferation．3．Afterisolatedandculturedfor14days，cellsweredividedintofourgroups：normalgroup、modelgroup(10neflmlPDGFstimulation)、400J-tg／mlAKF-PDtreatmentgroupand400