glp-1受体在大鼠肝星状细胞的表达及利拉鲁肽对高糖条件下大鼠肝星状细胞增殖的作用

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122056HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位GLP-1受体在大鼠肝星状细胞的表达及利拉鲁肽对高糖条件下大鼠肝星状细胞增殖的作用研究生:张丽娜导师:张力辉教授专业:内科学二级学院:第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公幵和使用。凡发表与学位论文主要内容

2、相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。,、•….•“一.-J:、,/.:••“1‘、•研究生签名导师签章:二级学院领导.盖章:.},f-Sg月h日/河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。研究生签名:妍印妁纟导师签章年、月了目录中文摘要

3、…………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………3英文缩写………………………………………………………………………6研究论文GLP-1受体在大鼠肝星状细胞的表达及利拉鲁肽对高糖条件下大鼠肝星状细胞增殖的作用前言………………………………………………………………………7材料与方法………………………………………………………9结果………………………………………………………………19附图………………………………………………………………21附表………………

4、………………………………………………26讨论………………………………………………………………28结论………………………………………………………………31参考文献…………………………………………………………32综述GLP-1及其类似物对于非酒精性脂肪性肝病的作用……………35致谢…………………………………………………………………46个人简历…………………………………………………………48中文摘要GLP-1受体在大鼠肝星状细胞的表达及利拉鲁肽对高糖条件下大鼠肝星状细胞增殖的作用摘要目的:目前非酒精性脂肪性肝

5、病(non-alcoholicfattyliverdiseaseNAFLD)的发生日益增加。NAFLD包括从肝脏脂肪变性到脂肪性肝炎,进而发展为肝脏纤维化,最终至肝硬化的一系列病变。但是目前尚没有药物可以治疗NAFLD。胰高血糖素样肽-1(Glucagon-likepeptide-1GLP-1)是由肠道内分泌细胞L细胞分泌的一种重要的肠促胰岛素,GLP-1类似物利拉鲁肽作为降糖药物已广泛的应用于临床,其胰腺外作用是目前糖尿病领域关注的热点。GLP-1受体介导的抗脏器纤维化作用已得到初步证实,其机制非常复

6、杂,在不同的脏器可能存在不同的作用通路,并且一些参与脏器纤维化的关键细胞如肝星状细胞(hepaticstellatecellsHSC)等最有可能参与其中。那么作为肝纤维化的关键细胞HSC上是否存在GLP-1受体的表达呢?本实验旨在探讨GLP-1受体在大鼠HSC是否表达及GLP-1类似物利拉鲁肽对高糖条件下大鼠HSC的作用,从而探讨其对于NAFLD及肝脏纤维化的作用。方法:1大鼠HSC的培养:大鼠HSC复苏后接种于无菌塑料培养瓶中,37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中常规培养,培养液为含体积分数

7、为10%胎牛血清的1640,每天换液1次,48小时后提取样本于显微镜下进行形态学鉴定,并进行后续实验分析。2Western法检测GLP-1受体蛋白在大鼠HSC的表达。3Real-timePCR法检测大鼠HSCGLP-1受体mRNA的表达。4分组干预:将培养48小时的大鼠HSC分7组分别为正常糖对照组(5.5mmol/L)、高渗对照组(5.5mmol/L低糖+19.5mmol/L甘露醇)、高糖对照组(25.0mmol/L)、高糖+低浓度利拉鲁肽组(50nmol/L)、高糖+中浓度利拉鲁肽组(100nmol

8、/L)、高糖+高浓度利拉鲁肽组(200nmol/L)、正常糖+高浓度利拉鲁肽组(200nmol/L)。5MTS法检测上述7组细胞的增殖情况。1中文摘要6数据分析:所得数据采用均数±标准差(xs)表示,统计分析运用SPSS13.0软件。采用方差分析对各个时间点的7组的光密度(opticaldensityOD)值进行比较,采用Bonferroni法进行两两比较,探讨同一时间点具体不同的组的差别。对不同时间点的高糖+高浓度利拉鲁肽采取配对t检验

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