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《黄芪抑制大鼠肝星状细胞增殖及胶原分泌的研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中西医结合肝病杂志年增刊,黄蔑抑制大鼠肝星状细胞增殖及胶原分泌的研究马红王宝恩马t梅贾挂东,北京友谊医院(北京100050)、、,,.黄蔑具有健牌益气升旧等功效有研究衰明、,黄蔑可211状细班的存活率此度及鉴定在本实脸条件下HSC..减轻大叹肝纤维化程度lt]本研究拟砚察黄蔑对体外培葬大爪的产率约为2XI口至IXI护台盼兰染色显示断分离的星状eeseaee,titlltellH)增殖及胶原分泌的形,肝垦状细胞(H琳CS细脸存活率在90%左右在萦外光30nm下呈现蓝萦色自发,。响以门明黄茂抗肝纤维化的机理.,荧光井很快消退透射电
2、镜下可见细胞内有大t脂肪摘1材料与方法.氏二in免痊荧光染色为阳性..11黄茂提取液的创备黄蔑提取液由北京友谊,医院侧荆中22黄茂琦星状细厄增挂的影响结果表明黄蔑(经.,、.,.心制备经水煎浓缩生药含t址/ml经。45料m建膜过滤,。45拌m旅膜过滤)对星状细胞的增殖具有明显的抑制作用且,。后4℃贮存备用,.随,药物荆t的增加MTT转化减少细胞增殖抑制作用逐渐.12杆!状细4,。。跪的分离及培养川选用0~5009雄性大限增强呈荆t依按性结果见表1.,.(晌自中国医学科学院实脸动物中心清洁级)行门静脉抽管,班1不网荆.t贫对月状
3、门.一班的.晌(又土S)循环滋注柑必胶原醉和链,蛋白醉E(S电am产品)进行梢化e并将消化所得细胞悬滚经密度梯度离心(以18%Ncydo拙为药钧加t(mg/ml)抑翻率(%)存活串(%)。介质)加以纯化将HSC惫浮于含20%胎牛血清(FCS)的对照组1o,5ZDMEM/IMDM培养液中以1X10c/m接种于塑料培养瓶.。.0752999701,.。中10天左右传代本实验所用星状细胞均为传一代细胞.。,1564169584.、13MTI法砚察黄茂对肝星状细厄增技的影响阁传一代...3127189282,星状细胞均匀种于96孔培养
4、板中进行培养待细班长演瓶底。.6259659035,后换用含5%FCS的DMEMI/MDM培养液培养24小时后加..二1,`一目知,.14768524é,哎0人黄蔑(以含5%FCS的DMEMI/MDM培养液倍比稀释...,.。19358065。45户m旅膜过碑)6孔重复另设空白对照组培养48小时...,a29817019后吸出培养液各孔加人20川浓度为。05%的MTT(isgm,,,-产品)37℃继续培养4小时吸出培养液各孔加人20川DM,,,Zmg/ml黄茂以)并混匀在醉标仪上检侧波长为492nm的光密度值从表l中可见作用4
5、8小时星状细饱的存。。。90(OD492nm)活率在%以上此浓度即作为以下实脸中所采用的浓度.存=(药物组ODOD值)Xl23黄茂对里状细地分泌胶原的影响结果见表.2活率值/对照组o%MTT转化率=(l一药物组OD值/对照组OD值)X班Zt蔑对.状细自分场胶.的影晌(又士S)100%1纽胶耳,组胶原柑纽胶爪最后选择90%以上的星状细胞存活的浓度作为以下实验......。AC组7619士06886505士04283196士0257所用药物浓度.、、......,w’..14ELis人法检侧!状细地I里胶琢的分泌’[]传一AC+黄
6、蔑组5987士05764141士0302二2670士0216,..·代星状细血在培养瓶中生长3天后换用含mZg/ml的培养液抑创串(%)214363165,,(AC十黄蔑组)此浓度下且状细班的存活率在90%以上同时:.·注与AC组相比P<005P<001,。二设空白对照组(AC组)培养48小时后收集上清液⋯、、,将I.份型胶原标准品用lx包被液倍比稀释浓度3讨论.。,范围1562~IOg/ml;细胞培养上清液中加人l/9体积的10黄茂是传统的扶正补气药物之一研究表明黄蔑能明显0n,。。X包被液将标准品及待检样品包被在ELA板上
7、进行检侧降低主动脉和肺内的胶原含ts1[但目前少有有关黄蔑对肝纤.。。,15统计学处理采用SPSS统计软件进行数据的分析处理维化作用的研究报道我们以往的研究显示黄蔑可使免咬扳。,、各组间比较用随机分组方差分析〔F位脸)伤性肝纤维化大鼠的纤维化程度明显减轻减少总胶原及I、,,2结果Iv型胶原在肝脏的病理性沉积且随粉疗程的延长作用9中西医结合肝病杂志年增刊。]lt有所增强,少胶原纤维在肝脏内的沉积这可能是其抗纤维化的机理之,t大研究已证实HCS是肝纤维化发生过程中过度沉积的.细地外羞质(ECM)的主耍细胞来耳.t]HSC今与发病的
8、关健,考文狱.。,,,,取决于其能否被激活将HSC培葬于羞底康样堵养羞上HSC1马红王宝瓜陈里阳等货蔑对免痊扭伤性肝纤维化大皿的治.,,:“”,疗作用中西医结合开脚杂志i,97732处于静止状态而将HCS培养于未包被模拟生物羞质的塑..,,,“”,2陈原稼王宝思马雪梅等大爪贮
