泰山羊肚菌液体培养条件优化及富铁、锌、硒研究初探

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1、山东农业大学硕士学位论文泰山羊肚菌液体培养条件优化及富铁、锌、硒研究初探姓名：李娟申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：贾乐20050601关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部

2、或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：拗导师签名：砺身、曰期：口f．。6英文缩略表山东农业大学硕士学位论文中文摘要泰山羊肚菌采自泰山海拔200～600米的山坡处，经分离纯化而得。本文以泰山羊胜菌为出发菌株，通过正交实验、单因素实验等方法确定了泰山羊肚菌液体培养及产胞外多糖最佳培养基和培养条件，为工业化生产羊肚菌菌丝体及其胞外多糖提供了理论依据。利用泰山羊肚菌对微量元素具有较强富集功能的特性，采用液体培养对铁、锌、硒进行了富集与生物转化的研艽，

3、获得了富铁、锌、硒羊肚菌菌丝体，为补充微量元素产品的开发奠定了理论基础。在此基础上，对富硒羊肚菌菌丝体进行了一系列生化指标的测定，如氨基酸组成及含量的测定、全蛋白含量的测定及分析、以及有机硒在富硒菌丝体内的分布情况，为以后富硒羊肚菌的应用及进一步工作的开展打下基础。以生物量与胞外多糖为指标，对泰山羊肚菌的培养基组成和发酵条件进行优化，确定泰山羊肚菌最佳摇瓶培养基组成为麸皮2009／L，葡萄糖309／l，，NHNOa29／L，KH。Pq29／L，MgSO。·7H。01．59／L。最佳发酵条件为20℃，起始pH值6．5，装液量lOOmL／25

4、0mL三角瓶，接种量lO％，摇床转速200r／min，发酵时问4d。在此条件下，其生物量(8．39／I，)比对照(6．59／L)提高了27．7％，其胞外多糖含量(2135．441ng／mL)比对照(1454．639幢／mL)提高了46．8％。通过单元素富集实验确定了铁、锌、硒在培养基中的最适添加浓度，结果表明，适宜浓度的微量元素能够明显促进菌丝体的生长，提高菌丝体的生物转化能力和有机微量元素含量。在培养基中添加最适硒离子浓度200ppm，得到富硒羊肚菌菌丝体。通过与未富硒羊肚菌菌丝体相比较，分析所得富硒羊肚菌菌丝体的营养成份、有机硒的分布

5、情况。氨基酸组成分析表明，富硒羊肚菌菌丝体中氨基酸含量除半胱氨酸和蛋氨酸含量略低外，其余氨基酸含量明显升高，总氨基酸含量比对照增加55．2％，半胱氨酸和蛋氨酸含量降低的原因可能是硒与这两种氨基酸结合生成硒代物；富硒菌丝体中8种人体必需氨基酸比对照相对提高了53．4％。而且蛋白质含量也相应提高，比对照提高了44．】4％。有机硒的分布情况表明，硒主要存在于羊肚菌菌丝体内的蛋白泰山羊肚茁液体培养条件优化及富铁、锌、硒研究初探质中，占总有机硒的74．13％；其次是多糖；在核糖核酸中存在最少。关键词泰山羊肚菌；液体培养；胞外多糖；生物富集；铁；锌；

6、硒山东农业大学硕士学位论文ABSTRACTMoJvhellaesculentawascollectedfromthehillsideabout200～600metersofMountTaiinChina．Inthisresearch．weuseMorchellaeSClglentaaSoriginalstraintostudyitsoptimumfermentationcultureandconditions．AccordingtoMorchellaesculenta’Ssuperabilityofaccumulatingtraceele

7、ments，weobtainedtllemyceliawhichaccumulatedFe．ZnandSe．thenstudiedthemycelia’Saccumulationsanditscapacityofbiotransformation．T11eresearchWOrkWaSreportedinthispaper,ThemajorcontentsareaSfoUows：Theoptimalferrnentationconditionswereworkedoutthroughorthogonattestandsinglefacto

8、rtest．TheoptimnlTlfermentationcultureandfermentationconditionsofdryweightandEPSproducedbyMorchel