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时间:2018-11-12
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1、香菇菌富硒液体发酵条件的优选试验[摘要]在香菇菌液体发酵的基础上,先对香菇菌种加硒驯化,再进行富硒香菇液体深层发酵的工艺条件实验。研究香菇菌丝体在发酵过程中对有机硒的耐受力和生物转化力。结果表明:经过驯化后的香菇菌在含有60mg/kg亚硒酸钠(Na2SeO3)的固体培养基上和含有80mg/kg亚硒酸钠(Na2SeO3)的液体种子培养基及含有130mg/kg亚硒酸钠(Na2SeO3)的液体发酵培养基中生长良好,并可以在菌丝体内富集硒。 [关键词]富硒香菇;菌种加硒驯化;液体发酵 [Abstract]Onthebasisoflentinusedod
2、esliquidfermentation,firstlydomesticationofseleniumonlentinusedodes,theneddeepfermentationtechnicsexperimentsforlentinusedodesliquidofselenium-enriched,ationoflentinusedodesmyceliumtoorganicseleniumintheprocessoffermentation.Theresultsshogroediumscontaining60mg/kgNa2SeO3,liquids
3、eedmediumscontaining80mg/kgNa2SeO3andliquidfermentationmediumscontaining130mg/kgNa2SeO3,andenrichseleniuminthemycelium. [Key-enrichedLentinusedodes;Bacterialdomestication;Liquidfermentation 香菇(lentinusedodes)属担子菌纲伞菌目香菇属。从香菇中提取的香菇多糖颇受医药学科研究工作者的重视,特别是富硒香菇多糖。据现代研究证实它具有较强的抗病毒、抗肿
4、瘤、抗衰老等作用。是辅助性T细胞活性的恢复剂和巨噬细胞参与的T细胞免疫增强剂。但是,由于产量低价格昂贵,临床应用受到一定限制[1-3]。 如果在香菇菌液体发酵时,把亚硒酸钠添加到培养基中,通过菌丝细胞内物质代谢转化,使有机硒结合到大分子活性物质上,成为有机硒多糖和硒蛋白。用这种方法得到的富硒香菇产品,较栽培法具有周期短,效率高,成本低等优点,是食药两用的优良产品。 本实验在原香菇菌深层发酵的基础上,对富硒香菇的液体发酵条件,进行了初步的探讨。 1实验材料 1.1出发菌株 由本室提供 1.2培养基 1.2.1基础斜面培养基(PDA)土豆(去
5、皮)200g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾(KH2PO4)3g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)1.5g、水1L、pH6.0。 1.2.2基础种子培养基蔗糖20g、葡萄糖20g、黄豆饼粉10g(浸出液)、酵母粉4g(酶解)、蛋白冻2g、玉米粉10g、磷酸二氢钾(KH2PO4)1g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.6g、水1L、pH6.0。 1.2.3基础发酵培养基蔗糖20g、葡萄糖20g、黄豆饼粉15g(不必制成浸出液)、酵母粉4g(酶解)、蛋白冻2g、玉米粉10g、磷酸二氢钾(KH2PO4)1g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.6g、水
6、1L、pH6.0。 1.3化学试剂 亚硒酸钠(Na2SeO3)及其他化学试剂均为国产分析纯。 2实验方法 2.1香菇菌种加硒驯化 将4℃冰箱保存的香菇菌,接种到基础斜面培养基上,进行活化培养,传至3代后,菌丝生长丰满,为实验用斜面。采用梯度法,在固体培养基中逐步增加硒的含量,浓度分别为20、40、60、80、100mg/kgNa2SeO3诱导菌丝体对硒的耐受能力。方法为:将活化好的母斜面在无菌条件下,取适量菌丝,接种到含硒20mg/kg的斜面培养基上,26℃恒温培养。72h后,每隔24h观察一次菌丝生长情况。当菌丝长满斜面时,再接入到含硒40
7、mg/kg斜面培养基上培养。以此类推逐级驯化,每个梯度接种5支斜面并根据菌丝生长情况进行重复培养。 2.2摇瓶种子培养 在500ml三角瓶内,装入80ml分别含有60、70、80、90、100mg/kgNa2SeO3种子培养基,以无硒种子培养基作对照,取经过初步驯化的香菇菌斜面,挖块约1cm2接入瓶内,置26℃恒温摇床,170r/min,培养7h,测定菌丝干重。 2.3摇瓶发酵培养 在500ml三角瓶内,装入100ml分别含有70、90、110、130、150、170mg/kgNa2SeO3发酵培养基,以无硒发酵培养基作对照,将加硒培养的种子液
8、接入发酵瓶内。初始pH值6.0,26℃恒温摇床170r/min,培养7h,测定菌丝干重。每个梯
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