益肾化瘀方对 tgf-β1诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化的tgf-β1smad23信号通路的影响

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1、河南中医学院２０１３届硕士研究生学位论文益肾化瘀方对TGF-β1诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化的TGF-β1/Smad2/3信号通路的影响研究生姓名：赵威导师：张琳琪教授指导组成员：张翥教授高志卿副教授学科、专业：中医内科学所属院、部：第一临床医学院中国﹒郑州２０１３年4月30日硕士学位论文原创性声明本人所呈交的硕士学位论文，是在导师张琳琪教授的指导下，独立进行科学研究工作所取得的成果。除文中已特别加以注明引用的内容外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果

2、由本人承担。特此声明。论文作者(签名)：年月日硕士学位论文使用授权声明本人已完全了解河南中医学院有关保留、使用硕士学位论文的相关规定，同意学校保留或向国家有关部门、机构送交本学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权河南中医学院可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本论文(注：保密论文在解密后适用本授权声明)。特此声明。论文作者(签名)：导师(签名)：年月日年月日目录前言.......................................................4材料与方法.......

3、............................................6结果......................................................151细胞形态学的变化.......................................152益肾化瘀方对TGF-β1诱导的NRK52E细胞TGF-β1、α-SMA、p-smad2/3表达的影响.....................................15讨论.............................................

4、.........191现代医学对肾间质纤维化的研究...........................192.TGF-β1/Smads信号转导通路............................203肾间质纤维化的中医病因病机认识.........................234益肾化瘀方对肾小管上皮细胞转分化中TGF-β1及Smad2/3表达的影响...25结论......................................................27致谢........................................

5、..............28参考文献....................................................29附录......................................................32附录1图片...............................................32附录2文献综述...........................................35摘要摘要目的：实验研究益肾化瘀方对TGF-β1诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)发生转分化的作

6、用以及对TGF-β1、α-SMA、p-Smad2/3表达的影响，探讨益肾化瘀方对RIF防治作用的可能机制，为临床上应用益肾化瘀方防治RIF提供理论依据。方法：以缬沙坦（缬沙坦）组为阳性对照，将体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞分为：①正常对照组；②TGF-β1刺激组；③益肾化瘀方低剂量组；④益肾化瘀方中剂量组；⑤益肾化瘀方高剂量组；⑥缬沙坦组。培养48h后取出，应用实时荧光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR，RTFQPCR)技术检测TGF-β1mRNA、α-SMAmRNA和免疫细胞化学技术检测细胞p-smad2/3蛋白表达。结果

7、：(1)与正常对照组相比，TGF-β1刺激组细胞从铺路石样上皮细胞向梭形肌成纤维细胞转变，益肾化瘀方大剂量组及缬沙坦组细胞形态学变化均较小，仍保持铺路石样生长。益肾化瘀方中、小剂量组均表现为部分细胞呈现铺路石样，部分细胞呈梭形，两者数量比例基本相当。（2）与正常对照组相比，TGF-β1诱导组细胞α-SMA、TGF-β1的mRNA及p-Smad2/3蛋白表达显著升高（P＜0.05），益肾化瘀方大剂量组α-SMA、TGF-β1的mRNA及p-Smad2/3蛋白表达无统计学差别（P＞0.05）；益肾化瘀方大剂量组和缬沙坦