温莪术对tgf-β1诱导肾小管上皮细胞转分化的干预作用

《温莪术对tgf-β1诱导肾小管上皮细胞转分化的干预作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、论文题目：渔董苤盟!鱼星：垦：!透昱竖丛!笪土廑细胞装盆丝的王亟佳昱答辩委员会主席：衄童登塾援答辩委员会成员：衄童登熬援塞4毅主焦医娅董玉迭主任虫医垣2量搅医堂瞳亟±堂焦迨塞lI哪10哪帅㈣㈣吣删100IY2397504目录缩略词表⋯⋯⋯···⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯军中文摘要⋯⋯⋯····⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯多Abstract⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯·7前言⋯⋯．．．．⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯·⋯⋯彤刚吾⋯⋯一一⋯⋯⋯⋯一一⋯⋯⋯一⋯⋯⋯一⋯一刀材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯··侈实验结果⋯⋯⋯．···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯

2、⋯·功分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··力结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯．形参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯韶附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··彩致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··衫综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··彩独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯·····⋯··彭全文缩略词表AGEadvancedglycationendproducts终末期糖基化产物AngIIAngiotensinII血管紧张素UCKDChronicKidneyDisease慢性肾脏病Co卜ICollagenII型胶原蛋白DMSODimethyl

3、Sulfoxide二甲基亚砜ESRDendstagerenaldisease终末期肾病ECMExtracellularmatrix细胞外基质EMTEpithelial—myofibroblast上皮一间充质细胞转分化transdifferentiationE-cadE-cadherinE一钙粘素Fsplfibroblastspecificproteinl成纤维细胞特异性蛋白lFNFibronectin纤维连接蛋白HGFhepatocytegrowthfactor肝细胞生长因子IL一1Interleukin1白细胞介素一1ILKIntegrin—linkedkinase整合素连接

4、激酶MFMyofibroblast肌成纤维细胞MMP一2Matrixmetalloproteinase一2基质金属蛋白酶一2MMP一9Matrixmetalloproteinase-9基质金属蛋白酶一9NRK一52ENormalratkidneycell大鼠肾小管上皮细胞ODOpticaldensity光密度PKCproteinkinaseC蛋白激酶CPBSPhosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液RASRenin—angiotensinsystem肾素一血管紧张素系统RIFRenalinterstitialfibrosis肾小管间质纤维化TGF—pTransf

5、orminggrowthfactor—B转化生长因子一BTBMTubularbasementmembrane肾小管基底膜UUOUnilateralureteralobstruction单侧输尿管梗阻Zo‘1Zonaoccludensprotein1紧密连接蛋白一1按首字母顺序排列4温莪术对TGF．13，诱导肾小管上皮细胞转分化的干预作用中文摘要目的：本研究在体外建立大鼠肾小管上皮细胞转分化(Epithelial-myofibroblasttransdifferentiation)模型，通过检测细胞骨架蛋白岱．actin，上皮细胞黏附分子E．cad，纤维化标志a．SMA、ILK、

6、FN、C01．I等蛋白及基因的表达，探讨温莪术对EMT的干预作用及可能的作用机制。方法：通过MTr法选取合适的温莪术含药血清给药浓度后，将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK．52E)随机分为6组：正常对照组、TGF．p1诱导模型组、温莪术低浓度组、温莪术中浓度组、温莪术高浓度组、盐酸贝那普利组，其中温莪术及盐酸贝那普利均以体外制作的含药血清方式给药。除正常对照组外，各组转化生长因子．131(Transforminggrowthfactor-13l，TGF．131)以10ng／mL的浓度诱导24h后，温莪术组及盐酸贝那普利组再加入药物作用48h。运用倒置显微镜观察各组细胞形

7、态学的改变，细胞免疫荧光法检测各组细胞浆内骨架成分B．肌动蛋白(B．actin)，纤维化标志物a．平滑肌肌动蛋白(a．smoothmuscleactin，a—SMA)的分布；用实时荧光定量PCR法检测上皮细胞黏附分子E钙黏蛋白(E．cadherin，E．cad)mRNA、及细胞内a．SMA、整合素连接激酶(Integrin．1inkedkinase，ILK)、纤维黏连蛋白(fibronectin，FN)、I型胶原蛋白(CollagenI，C01．I)的mRNA的表达；用ELISA法检测各组细