人参皂甙rg1对tgf-β1刺激肾小管上皮细胞转分化及增殖作用

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1、四川大学硕士学位论文人参皂甙Rg1对TGF-β1刺激的肾小管上皮细胞转分化及增殖的作用姓名：李会娟申请学位级别：硕士专业：内科学（肾内）指导教师：樊均明20070501声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料．与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的，论文成果归

2、四川大学所有，特此声明。申请人：指导教师：钐碣结姒四1il大学临床医学硕士专业学位论文人参皂甙Rgl对TGF-B1刺激的肾小管上皮细胞转分化和增殖的作用研究生：李会娟导师：樊均明教授中文摘要目的：肾问质纤维化是各种肾脏疾病进展至终末期肾病的共同通路。肾小管上皮细胞一肌成纤维细胞转分化(TEMT)，肾小管上皮细胞的凋亡增加和增殖能力的下降在肾间质纤维化的进展中起着重要的作用。a．平滑肌肌动蛋白(a-SMA)是肌成纤维细胞的标志性蛋白。业已证实转化生长因子．B1(1’GF．B1)可以诱导肾小管上皮细胞一肌成纤维细胞转分化，其发挥作用的下游因子为结

3、缔组织生长因子(CTGF)；TGF．131还可引起肾小管上皮细胞凋亡增加和增殖能力的下降，导致肾小管萎缩。已有礤究表明三七总皂甙(PNS)可以延缓肾间质纤维化的进展，改善肾脏结构和功能。人参皂甙Rgl(G·R91)是PNS的主要成分之一。本实验研究G—Rgl对TGF．81刺激的大鼠肾小管上皮细胞EMT及增殖的影响，CTGF的表达，细胞外基质成分胶原I(C01．I)，胶原III(C01．III)和纤维粘连蛋白(FIX／)的影响；探索G．Rgl在延缓肾间质纤维化中的作用及机制。方法：将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白对照组

4、，TGF．B1刺激组及不同时间和不同剂量的G—Rgl干预组。细胞增四川大学临床医学硕士专业学位论文殖实验每组设8复孔，培养1、3、5天，其余实验每组设3复孑L，培养5天。倒置相差显微镜观察细胞形态。免疫组织化学染色半定量检测a．SMA，CTGF的表达。a．SMA，CTGF的mRNA的检测采用RT-PCR的方法。ELISA法测定细胞培养上清液中C01．I，C01．[II和FN的含量。M'Iq"法检测细胞增殖。结果：(1)与对照组相比，培养5天后，TGF．81刺激组细胞形态学发生改变，从原有典型的铺路石样上皮细胞形态转变为长梭形类似成纤维细胞的形

5、态；免疫组织化学见大量a．SMA和CTGF阳性的细胞；RT-PCR结果示a．SMA、CTGF的mRNA表达明显增高(P

6、量减少(P

7、抑制其增殖，刺激细胞外基质的分泌，促进CTGF表达。2．G．Rgl可以抑制TGF-131刺激的NRK52E细胞的EMT，促进增殖，减少CTGF的表达和ECM的分泌。3．G，Rgl对TGF-B1刺激的TEMT的抑制作用可四川大学临床医学硕l。专业学位论文能与抑制TGF．B1的下游因子CTGF的表达有关。4．G—Rgl促进TGF—B1刺激的NRK52E细胞的增殖的作用可能与抑制TEMT，抑制CTGF的表达，减少ECM的分泌有关。关键词：人参皂甙Rgl；转分化；转化生长因子-B1；a-平滑肌肌动蛋白；结缔组织生长因子；细胞外基质；~frr四川大学临

8、床医学硕f：专业学位论文EffectofPanaxosideRglonRatRenalTubularEpethelialCellProliferationandTr