海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究

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1、海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究谨以此论文献给我尊敬的导师毛文君教授及给予我无限关怀和鼓励的父母王春宴i海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究学位论文答辩日期：指导教师签字：答辩委员会成员签字：ii海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机

2、构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日---------------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下事项：1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以

3、采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日iii海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究摘要海洋中蕴藏着丰富的微生物资源，红树林生态系统和江河入海口位于海洋与陆地交界的特殊环境，其微生物种类及其产物也具有自己的特

4、色。本文从五株不同来源海洋真菌的发酵液中提取胞外粗多糖，经分离纯化得到纯品多糖，并对所得的多糖组分进行化学组成、结构和抗氧化活性的研究。研究结果如下：1.从老鼠簕枝叶内生土曲霉菌Aspergillus.terreusW-8，海芒果根泥来源真菌黄柄曲霉AspergillusflavipesZHN1-09和海桑深层根泥真菌PJX-2的发酵液中分别提取得到三个胞外粗多糖LN,LD和PJX，利用Q-SepharoseFastFlow离子交换层析，Surperdex-75和SephacrylS-100凝胶渗透层析分离纯化得到五

5、个多糖组分lnw-c,ds2-2,ds4-1,jxw-2和jxs-2。经柱前衍生高效液相色谱（PMP-HPLC）和高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）分析表明，lnw-c中含有约2:1:1的GlcN，Man和Glc，为碱性多糖，ds2-2,ds4-1,jxw-2和jxs-2均含有高比例的Man。jxw-2和jxs-2为中性多糖，纯度均达到90%以上，分子量分别为5.6和9.7kDa。红外光谱和甲基化分析表明，jxw-2，jxs-2和ds2-2均以Man(1→，→2)Man(1→，→6)Man(1→和→2,6)Man(1→

6、四种连接方式为主，且jxs-2具有β-型糖苷键构型；lnw-c除甘露糖的连接片段外，还含有→6)Glc(1→和→2,6)Glc(1→的连接片段。2.从黄河三角洲水域梭鱼的内脏共附生土曲霉AspergillusterreusOUCMDZ-1925的发酵液中提取多糖，经Q-SepharoseFastFlow离子交换层析和SephacrylS-100凝胶渗透层析分离纯化得到两个多糖组分yw-2和yss。化学和HPGPC分析表明，yss纯度达到94.04%，分子量为18.6kDa。PMP-HPLC分析表明，yss由Man和G

7、al以7.70:1.00的比例构成。红外光谱、甲基化、一维，二维核磁共振波谱（1D,2DNMR）分析表明，yss为分支度较高的中性杂多糖，其主链主要含有→2)-α-D-Manp(1→和少量→6)-α-D-Manp(1→，支链位于→2)-α-D-Manp(1→的C-6，分支由→1)-α-D-Manp(6→1)-α-D-Manp和β-D-Galf(1→组成。该研究首次从梭鱼内脏真菌土曲霉Aspergillusterreus发酵液中分离得到结构新颖的以→2)-α-D-Manp(1→和→6)-α-D-Manp(1→为主链的半

8、乳葡聚糖，表明海洋共附生真菌是结构新颖的胞外多糖的重要来源。3.从海南文昌红树林根泥共附生青霉菌Penicilliumsp.H-25-02中分离得到粗1海洋真菌胞外多糖的结构及抗氧化活性研究多糖YQ，利用Q-SepharoseFastFlow离子交换层析和SephacrylS-100凝胶渗透层析纯化得到qw-2，qs1-1,qs-2s和qs-3