产云芝胞外多糖发酵工艺优化及抗氧化活性研究.pdf

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1、产云芝胞外多糖发酵工艺优化及抗氧化活性研究王吉中，耿卢婧，许春平＊（郑州轻工业学院食品与生物工程学院，河南郑州４５０００２）摘要：试验对云芝发酵生产胞外多糖的培养基进行优化并对其抗氧化活性进行研究，通过单因素试验和中心组合设计并用Ｄｅｓｉｇｎ－Ｅｘｐｅｒｔ７．０软件对实验结果进行分析，确定培养最优条件为氮源５．８７０ｇ／Ｌ多价胨，碳源５３．１２０ｇ／Ｌ麦芽糖，起始ｐＨ值为５，温度２８℃，搅拌发酵转速１５０ｒ／ｍｉｎ，多糖得率为１０．０９８２ｇ／Ｌ；对发酵多糖进行提取分离和脱蛋白处理得到ＥＰＳ，然后用邻二氮菲法和Ｄ

2、ＰＰＨ法测定了ＥＰＳ的抗氧化活性，结果表明，ＥＰＳ对·ＯＨ自由基和ＤＰＰＨ·自由基均具有较高的清除率，且具有较好的量效关系，说明云芝ＥＰＳ具有较强的抗氧化活性。关键词：云芝；胞外多糖；中心组合设计；抗氧化活性中图分类号：ＴＱ９２文献标志码：Ａ文章编号：１６７３－１６８９（２０１２）０７－０７５２－０７ＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｆｒｏｍＣｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒａｎｄＩｔｓＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＡｃｔｉｖｉｔｙ＊ＷＡＮＧＪｉ－ｚｈｏｎｇ，ＧＥＮＧＬ

3、ｕ－ｊｉｎｇ，ＸＵＣｈｕｎ－ｐｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄａｎｄＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂｙｕｓｉｎｇｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｎｄｃｅｎｔｒａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｅｄｅｓｉｇｎ，ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆＣｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒｆｏｒｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｗｅｒｅｄｅ

4、ｔｅｒｍｉｎｅｄａｓｐｏｌｙｐｔｏｎｅ５．８７０ｇ／Ｌ，ｍａｌｔｏｓｅ５３．１２０ｇ／Ｌ，ｐＨ５，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ２８℃ｓｈｅａｒｓｐｅｅｄ１５０ｒ／ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅＥＰＳｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｒｅａｃｈｅｄａｔ１０．０９８２ｇ／Ｌ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ＥＰＳｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｂｙＳｅｖａｇｍｅｔｈｏｄｔｏｒｅｍｏｖｅｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｂｙｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｏｎＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂｃｈｒｏｍａ－２＋ｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅ

5、ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＰｈｅｎａｎｔｈｒｏｌｉｎｅ－ＦｅｍｅｔｈｏｄａｎｄＤＰＰＨａｓｓａｙ．ＴｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｓｈｏｗｅｄｎｏｔａｂｌｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＯＨａｎｄＤＰＰＨｒａｄｉｃａｌ．Ｔｈｕｓ，ｔｈｅＥＰＳｆｒｏｍＣ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒｍａｙｂｅｓｕｐｐｌｉｅｄａｓｏｎｅｎａｔｕｒａｌｈｅａｌｔｈｙｆｏｏｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ｃ

6、ｅｎｔｒａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｅｄｅｓｉｇｎ，ａｎ－ｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ云芝（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）又名彩绒革盖菌、杂等功能。云芝中含有多种生理活性成分，其中最主色云芝、彩绒菌和瓦菌等，隶属非褶菌目，多孔菌要的成分之一就是云芝多糖。［１］科，栓菌属。子实体一般较小，无柄，呈覆瓦状排云芝多糖相对分子质量在１０万以上，是富含列。云芝是中药和食品中用途最为广泛的真菌之β－（１，３）糖苷键的葡聚糖，同时含有甘露糖、木糖、半［２－３］［１］一，具有健脾利湿、止咳平喘、清热解毒、抗肿瘤乳糖、鼠李糖

7、和阿拉伯糖。研究发现，云芝多糖收稿日期：２０１１－０８－２２基金项目：郑州市科技计划项目（１０ＰＴＧＧ３３９；１１２ＰＰＴＧＹ２４９）；郑州轻工业学院校博士基金项目（２０１００４２６）。作者简介：王吉中（１９７５－），男，河南周口人，理学硕士，讲师，主要从事生物技术研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｉｚｈｏｎｇ７５＠１６３．ｃｏｍ＊通信作者：许春平（１９７７－），男，河南焦作人，工学博士，教授，主要从事生物技术研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃ．ｐ．ｘｕ＠ｚｚｕｌｉ．ｅｄｕ．ｃｎ王吉中，等：产云芝胞外多糖发酵工艺优化及抗氧

8、化活性研究［４－５］具有多种药理和生理功能，从云芝子实体中提ｍＬ蒸馏水溶解沉淀；然后用苯酚硫酸法测定发酵取的多糖均具有极强烈的抑制癌细胞活性，抗氧化液中多糖质量浓度（ｇ／Ｌ）。［６］活性和免疫调节功能，是良好的免疫增强剂，可１．２．２培养基及培养条件优化氮源：在碳源为提高动物机体ＩｇＭ的量等作用；云芝多糖同时具有葡萄糖（３０ｇ／Ｌ）的条件下，实验选择的氮源有大豆保肝护肝作