姜黄素对tnf-α诱导的星形胶质细胞jnk及mcp-1表达的影响

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1、论文题目：姜黄素对TNF—Q诱导的星形胶质细胞JNK及MCP．1表达的影响答辩委员会主席：韭达题数援答辩委员会成员：韭达题教援拄厦拯鏊援拄函副教援．论文答辩日期：二。一三年五月十一日温州医学院硕士学位论文一、缩略词表．二、中文摘要一三、英文摘要⋯⋯⋯⋯目录lIIIII[I[[111[111[111[1[IIIII[IIfY2397248四、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．五、实验材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．六、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯七、分析与讨论⋯⋯⋯一八、结论⋯⋯⋯⋯⋯．．九、参考文献⋯⋯．十、附录⋯⋯⋯⋯．十一、致谢⋯⋯⋯．十二、论著、综述⋯十三、独

2、创性声明⋯3⋯．．(5)⋯．．(7)⋯．(9)⋯⋯⋯⋯．(11)．．．．．．⋯⋯．(20)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．，．．．．(26)⋯⋯．．(29)⋯⋯．(30)(34)(35)．，．．．．．．．．．．．．．．．(36)⋯⋯⋯⋯⋯⋯(43)温州医学院硕士学位论文缩略词表4温州医学院硕士学位论文姜黄素对TNF．Q诱导的星形胶质细胞,INK及MCP．1表达的影响硕士研究生：导师：王睿娴曹红教授中文摘要目的观察TNF．a诱导后星形胶质细胞JNK及MCP．1表达的影响。迸～步观察姜黄素对TNF一(It诱导后星形胶质细胞JNK及MCP一1表达的影响，为该药临床应用提供实验基础和理论依

3、据。方法将SD新生2d大鼠大脑皮层进行原代星形胶质细胞培养，第三次传代后神经胶质酸性蛋白(OFAP)免疫荧光染色法鉴定星形胶质细胞纯度。将培养星形胶质细胞分为正常组、姜黄素5runol·L～、10斗mol-L-1、201amol·L～、40}．tmol·L以和809m01．L‘1组，采用MTT检测不同浓度下姜黄素对星形胶质细胞生长抑制率的影响。选出姜黄素的最佳剂量。另培养星形胶质细胞将其分为6组：正常组(C组)、TNF．a组(T组)、TNF．c【+姜黄素组(Cur5组、Curl0组、Cur20组)、TNF一时溶剂对照组(D组)。C组不给予任何药物处理；T组培养基加入20ng-ml。1n盯一

4、晓，作用2h：Cur5组、Curl0组、Cur20组分别在给予20ng·ml～TNF一0t前给予5、10、209m01．L。姜黄索，提前孵育24h；D组在给予20ng·mlJn师．伍前给予1tll-mld二甲基亚砜(DMSO)，提前孵育24h。用免疫组化和ELISA方法检测MCP．1蛋白表达量的变化。用免疫印迹方法检测J-NK蛋白表达量的变化。结果1．形态学变化原代培养的星形胶质细胞经传代后，纯度较高，并随逐渐传代更加纯化，形态也逐渐变化。星形胶质细胞胞体较大、很扁，形态不规则，胞质较丰富，细胞核呈圆形或卵圆形，常偏于胞体的一侧，内有1～2个核仁。培养至20d左右，细胞生长状态良好，铺满培

5、养瓶底部并融合成单层，形成大致均一的扁平细胞层。温州医学院硕士学位论文2．细胞纯度鉴定星形胶质细胞经GFAP免疫荧光鉴定，在荧光显微镜下镜检，GFAP标记阳性者呈绿色荧光，阳性率达95％以上，即大多数为星形胶质细胞。3．MTT法检测星形胶质细胞生长情况星形胶质细胞的生长抑制率与姜黄素的浓度存在依赖性，呈反比关系。当姜黄素浓度分别为401am01．L。1和80junoi．L。1时，对细胞生长有明显影响。因此，剔除409rn01．L-1和801amol·L。的两个浓度。4．MCP．1表达的变化A、免疫组化：MCP一1在c组中少量表达，T组中MCP．1表达明显升高。姜黄素药物干预后，与T组相比，

6、Cur5组和Curl0组MCP．1表达差异无统计学意义(胗0．05)，而Cur20组MCP-1表达有所下降(P<0．01)。D组和T组之间差异无统计学意义(胗o．05)。B、ELISA：与C组相比，T组MCP一1表达明显升高(P

7、也无显著差异。结论TNF．a诱导后星形胶质细胞JNK及MCP．1表达上调。姜黄素可抑制TNF—t／,诱导后星形胶质细胞MCP一1的表达，且浓度201unol-L以时抑制率最大。浓度109m01．L。1时姜黄素可抑制n师．仅诱导后星形胶质细胞JNK的表达。【关键词】星形胶质细胞；TNF．0t；JNK；MCP-1；姜黄素6温州医学院硕士学位论文TheeffectofcurcuminOiltheexpressionofJNKa