梓醇对鱼藤酮诱导的星形胶质细胞的调节作用

《梓醇对鱼藤酮诱导的星形胶质细胞的调节作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、２？犬＾大季ｉｌ过ＤＡＬｌＥＲＳＴＹＯＦＴＥＣ＾ＯＬＯＧＹＩＡＮＬｔ＾Ｖｌｆ硕士享位论文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＳＨＥ梓醇对鱼藤酮诱导的星形胶质细胞的调节作用学科专业—学与分子—生物—学—――生物化作者姓名沈瑕宏指导教师■ＪＵＭｉｉ２０１６答辩日期———々—年—？月—硕士学位论文梓醇对鱼藤爾诱导的星形胶质细胞的调节作用ＲｅｕｌａｔｉｏｎＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣａｔａｌｏｌｏｎＡｓｔｒｏｃｔｅｓｉｎｄｕｃｅｄｂＲｏｔｅｎｏｎｅｇｐｙｙ

2、作者姓名：沈瑞芳学科、专业：生物化学与分子生物学学号：２１２１８０８２指导教师：姜波副教授完成日期：２０１５年５月大理工大營ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ大连理工大学学位论文独创性声明：作者郑重声明所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体巳经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果一。与我同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文

3、中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文题目：爲外滚故舍抖吊ｏ作者签名日期：二ｉｃ年／月／｝日大连理工大学硕士学位论文摘要一鱼藤酮（Ｒｏｔｅｎｏｎｅ）是种线粒体抑制类杀虫剂，对中枢神经系统有毒性作用，与＇帕金森病（ＰａｒｋｉｎｓｏｎｓｄｉｓｅａｓｅＰＤ）存在着潜在的联系。神经胶质细胞如星形胶质细胞和小胶质细胞与神经元相互作用，相辅相成，共同构成了神经系统，对神经系统起支持，调节作用。梓醇是从中药地黄中提取的神经活性物质，属于环烯醚蔽苷类。本论文以鱼

4、藤酮诱导的星形胶质细胞为研究对象，探究梓醇对该ＰＤ模型细胞的神经保护作用及其作用机制。主要研究内容与结果如下：（１）从新生小鼠大脑皮层中分离并培养星形胶质细胞和小胶质细胞，经免疫染色鉴定后，纯度都达到９０％以上。用不同浓度的鱼藤酮分别诱导损伤两种神经胶质细胞，细，存活率有不同程度的下降胞形态发生改变，其中星形胶质细胞对鱼藤酮的耐受性较高。（２）ＰＤ用鱼藤酮诱导损伤的星形胶质细胞作为细胞模型，梓醇预处理半小时后，检测梓醇对模型细胞的神经保护作用，，。利用ＭＴＴ法形态学观察以及各种生化检测方法进行研究，实验结

5、果表明：梓醇能显著提高鱼藤酮诱导的星形胶质细胞的存活率，同时对其形态有改善作用。此外，梓醇可降低星形胶质细胞内活性氧（ＲｅａｃｔｉｖｅＯｘｅｎｙｇｅｃｅｓ－ＳｉＲＯＳ）的生成，增加还原型谷ＳＨ）的Ｃａｓａｓｅ３ｐ胱甘肽（Ｇ含量，抑制半胱天冬酶ｐ的活性，减少胞外谷氨酸的积累。由此可见，梓醇可通过抗氧化作用，抗调亡作用，抗谷氨酸兴奋性毒性作用来抵抗鱼藤酮产生的神经毒性，进而起到神经保护作用。一（３）为了进步探讨梓醇抗谷氨酸兴奋性毒性作用的机理。我们利用实时定量ＰＣＲ技术和ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术分别检测了梓

6、醇对鱼藤酮处理后的星形胶质细胞中谷氨酸转运ＬＡＳＴ－１ｍＲＮＡ。体Ｇ和ＧＬＴ及其转运体蛋白表达量的影响结果表明，梓醇可显著增加受损星形胶质细胞内转运体ＧＬＡＳＴｍＲＮＡ及其蛋白的表达量－，但对ＧＬＴ１的表达量无＋＋显著影响－。此外，通过检测Ｎａ／ＫＡＴＰａｓｅ活性的改变，我们发现梓醇可以恢复由鱼藤＋＋一酮引起的Ｎａ－／ＫＡＴＰａｓｅ活性的降低，提高谷氨酸转运体的活性。由此可见，梓醇方一面通过影响谷氨酸转运体的表达量，另方面通过影响谷氨酸转运体的活性，来改善谷氨酸转运体的功能，促进星形胶质细胞对谷氨酸的摄取，从

7、而降低了胞外谷氨酸浓度，间接地起到保护神经元的作用。以上结果表明，梓醇可对鱼藤酮诱导的星形胶质细胞产生神经保护作用，包括其抗氧化作用，抗调亡作用，抗谷氨酸兴奋性毒性作用。其中抗谷氨酸兴奋性毒性作用是与＋＋梓醇能影响谷氨酸转运体ＧＬＡＳＴ的表达以及提高Ｎａ／Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性有关。关键词：梓醇；小胶质细胞；星形胶质细胞；谷氨酸转运体；神经保护－－Ｉ梓醇对鱼藤酮诱导的星形胶质细胞的调节作用ＲｅｕｌａｔｉｏｎＥｆｆｅｃｔｓｏｆＣａｔａｌｏｌｏｎＡｓｔｒｏｃｔｅｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＲｏｔｅｎ

8、ｏｎｅｇｐｙＡｂｓｔｒａｃｔＲｏｔｅｎｏｎｅ，ａｋｉｎｄｏｆｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｔｈａｔｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｈａｓｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｎ