嗅鞘细胞对活化的星形胶质细胞的作用

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1、嗅鞘细胞对活化的星形胶质细胞的作用作者：刘志元,刘锦波,张志坚,龚爱华,张俊【摘要】目的：研究体外培养的大鼠嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcell,OEC)对活化的星形胶质细胞(astrocytes,AST)的作用。方法：体外培养嗅鞘细胞和星形胶质细胞。星形胶质细胞经纯化传代,细胞融合后利用划伤法得到活化的星形胶质细胞,将嗅鞘细胞与活化的星形胶质细胞共培养24h后,观察星形胶质细胞增殖能力的改变,以及其表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)的变化。结果：活化的星形胶质细胞与嗅鞘细胞共培养后,

2、MTT实验表明其增殖能力增强;免疫荧光染色、RT-PCR和蛋白质印迹法测定结果表明共培养后活化的星形胶质细胞表达的GFAP和CSPG降低。结论：嗅鞘细胞作用于活化后的星形胶质细胞以后,能够促进星形胶质细胞的分裂增殖,同时能够减少星形胶质细胞胶质化,降低抑制性细胞因子的表达。【关键词】嗅鞘细胞;星形胶质细胞;增殖;胶质纤维酸性蛋白(GFAP);硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)　　[Abstract]Objective:Tostudytheeffectofolfactoryensheathingcellsonreactiveastrocyte

3、sinvitro.Methods：Olfactoryensheathingcellsandastrocyteswereculturedfrom15SpragueDawleyRatsinvitro.Astrocyteswerepurifiedthenpassagedandgrowntoconfluence.Somecultureswerescratchedtoinduceareactiveastrocytephenotype.Olfactoryensheathingcellswereaddedontoconfluentastrocytes

4、for24h.Thedifferencesofcellproliferation,expressionsofglialfibillaryacidicprotein(GFAP)andchondroitinsulfateproteoglycans(CSPG)weremeasuredamongthenormalgroup,activegroup,andthecoculturedgroup.Results：Whenolfactoryensheathingcellswerecoculturedwithreactiveastrocytes,th

5、eproliferationofreactiveastrocyteswasincreased,andadecreaseinGFAPandCSPGexpressionwasalsoobserved.Conclusion：Aftercoculturedwithreactiveastrocytes,olfactoryensheathingcellscanpromotetheproliferationofreactiveastrocytes,andreducetheastrocytegliosisandexpressionofinhibito

6、rycytokines.　　[Keywords]olfactoryensheathingcells;astrocytes;proliferation;GFAP;CSPG　　脊髓损伤的治疗是临床的一大难题,缺乏有效的治疗方法,因此一直是科研人员和临床工作者关注的重点。嗅鞘细胞(olfactoryensheathing15cell,OEC)本身具有促进神经细胞和嗅神经再生的重要功能,而且能够分泌多种神经营养因子和促进神经再生修复的黏附分子[1]。脊髓损伤后嗅鞘细胞移植有利于轴突的再生,减少组织的丢失,促进运动功能的恢复[2-3]。　　脊髓损

7、伤后由星形胶质细胞(astrocytes,AST)等过度增生的胶质瘢痕是影响轴突再生和功能恢复的主要不利因素。嗅鞘细胞容易与星形胶质细胞混合生长,不会引起后者的肥大以及硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)表达的增加。不仅如此,嗅鞘细胞移植到损伤的脊髓背根后,传入纤维的轴突能够穿越损伤区域的胶质瘢痕到达脊髓,轴突与神经元再次建立功能联系[4]。Li等[5]认为嗅鞘细胞的修复作用尤其是促轴突再生,形成新的传导通路等方面与星形胶质细胞密切相关。　　嗅鞘细胞是否作用于损伤早期活化的星形胶质细胞,从而减少其增生,减轻胶质瘢痕的形成还不是很清楚。本实验采

8、用体外细胞共培养的方法,排除脊髓损伤后复杂的细胞环境等其他因素干扰,探讨嗅鞘细胞对活化的星形胶质细胞增殖能力、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和CSPG表达的影响以及可能机制。　　1材料和方法　　1.1材料15