炎性因子对星形胶质细胞活化及sPLA2-ⅡA表达的影响

《炎性因子对星形胶质细胞活化及sPLA2-ⅡA表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、单位代码10475学号104753140957分类号R74硕士学位论文炎性因子对星形胶质细胞活化及sPLA2-ⅡA表达的影响学科、专业：神经病学研究方向：神经炎症申请学位类别：医学硕士申请人：李雪粉指导教师：陈文武教授二〇一七年五月I万方数据II万方数据EffectsofinflammatorycytokinesontheactivationofastrocytesandtheexpressionofsPLA2-ⅡAADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequir

2、ementsfortheDegreeofMasterofMedicineByLiXuefenSupervisor:Prof.ChenWenwuMay,2017III万方数据IV万方数据关于学位论文独创声明和学术诚信承诺本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在此本人郑重承诺：

3、所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。学位申请人（学位论文作者）签名：2017年月日关于学位论文著作权使用授权书本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文（纸质文本和电子文本）以供公众检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文（纸质文本和电子文本）。（涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书）学位获得者（学位论文作者）签名：2017年月日学位论

4、文指导教师签名：2017年月日I万方数据II万方数据摘要背景与目的：在各种中枢神经系统疾病，如颅脑损伤、脑卒中、癫痫、退行性疾病中，均伴有不同程度的神经炎症反应。炎性因子促进炎症反应的发生发展，炎症反应中又会产生炎性因子。星形胶质细胞是脑内数量最多的一大类细胞群体，在神经炎症反应中星形胶质细胞活化并起着重要作用。分泌型磷脂酶A2属于磷脂水解酶家族中的一类，它与炎症密切相关。本研究旨在探索大鼠大脑皮质星形胶质细胞的分离、纯化和体外培养的方法，并研究在炎性因子作用下，星形胶质细胞的活性变化以及其产生的sPLA2-ⅡA表达量的变化，进一步探讨其可能存在的机制。方法：在体外原代培养大鼠大脑皮质星形胶

5、质细胞的基础上，取第4代培养的细胞用于实验。随机分为对照组和实验组。实验组分别为：10ng/mlIL-1β组，100ng/mlIL-1β组，10ng/mlTNF-α组，100ng/mlTNF-α组，10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α组，100ng/mlIL-1β加100ng/mlTNF-α组。24小时后用CCK-8检测细胞活力。再选取10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α组继续进行实验。通过实时荧光定量PCR和ELISA，检测IKKα、IKKβ、NF-B、p65和sPLA2-ⅡA等的表达量变化。结果：通过分离、纯化获得了形态典型的大鼠大脑皮质星形胶质细胞。细胞形

6、态不规则，突起较多较长，呈放射状。GFAP免疫染色显示纯度达95%以上。实验组细胞的活性均高于对照组。其中，100ng/mlIL-1β组、100ng/mlTNF-α组、10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α组和100ng/mlIL-1β加100ng/mlTNF-α组的细胞活性明显高于对照组，有统计学意义（P<0.05,P<0.001,P<0.001,P<0.001）。10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α组与对照组相比，sPLA2-ⅡA在mRNA和蛋白水平表达量显著升高，有统计学意义（P<0.05）。NF-B在mRNA和蛋白水平表达量在10ng/mlIL-1β加10

7、ng/mlTNF-α组明显高于对照组，有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比，10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α组的IKKα、IKKβ和p65的表达量均增高，有统计学意义（P<0.05，P<0.05，P<0.05）。结论：当受到炎性因子刺激时，星形胶质细胞活化同时sPLA2-ⅡA表达增高，很可能是通过IKKα/IKKβ-NF-B-sPLA2-ⅡA途径产生的。关键词：星形胶质细胞，细胞培养