乳过氧化物酶的分离纯化及其在冷却猪肉保鲜中的应用

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1、四川农业大学硕士学位论文乳过氧化物酶的分离纯化及其在冷却猪肉保鲜中的应用姓名：肖岚申请学位级别：硕士专业：农产品加工及贮藏工程指导教师：李诚20070601捅要近年来出现的众多食品安全问题，使食品保鲜剂受到消费者广泛关注，并对天然保鲜剂表现出浓厚的兴趣。本实验希望寻找一种天然、安全的食品保鲜剂，并使其能够在冷却猪肉的保鲜方面得以应用。乳过氧化物酶体系(简写LPS)是鲜牛奶中固有的一种天然抗菌活性体系，满足保鲜剂天然、安全的要求；同时随着我国乳品工业的不断发展，奶酪产量不断的增加，其副产物乳清的产量也将不断增加，因此生产LP的原料极为丰富；另外

2、，随着人们生活水平的不断提高，冷却猪肉已经成为猪肉生产、流通、销售的主要形式。因此，将LPS用于冷却猪肉的保鲜符合市场的需要和未来的发展趋势，而且在理论上也具有可行性。鉴于LPS普遍公认的安全性(GRAs)和抑菌特性，本课题拟对乳过氧化物酶体系做一些研究和探索。l、采用强阳离子交换色谱梯度洗脱法，对牛乳中的乳过氧化物酶进行分离和纯化，利用SDS．PAGE、考马斯亮蓝定性定量检测，从而为LP的大规模开发提供科学依据。2、采用分光光度法、菌体量法以及打孔扩散法研究乳过氧化物酶对食品中常见污染菌的抑制作用，从而为LP作为保鲜剂应用提供实验依据。3、

3、把LPS用于冷却猪肉保鲜中，并使用在冷却猪肉保鲜中应用最为广泛的天然保鲜剂之一Nisin作对比试验，观察LPS用于冷却猪肉的保鲜效果，为冷却猪肉的保鲜探索一条新途径。结果表明：l、分离出的乳过氧化物酶显示为单一区带，相对分子量为76186D。该酶酶活回收率为83．07％，纯化倍数达到103．33倍。2、LP对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、黄曲霉和产黄青霉等7种常见的食品污染菌均有一定的抑制作用。其中，LP对黄曲霉的抑制作用最显著，4ttg／ml就能完全抑制其生长。LP在中性偏酸性环境中的抑菌活性比碱性环境的抑

4、菌活性强。一定温度内处理不影响LP的抑菌活性。在自然pH条件下，LP抑制供试革兰氏阴性菌、霉菌和酵母菌的能力强于Nisin，且LP和Nisin具有协同抗菌作用。3、LPS和Nisin单独用于冷却猪肉保鲜时，浓度分别为3ttg／ml和499／ml的LPS的保鲜效果均明显地优于浓度为40ttg／ml的Nisin，差异达到显著水平(P

5、靠的实验依据。关键词：冷却猪肉；保鲜；乳过氧化物酶体系(LPS)；分离纯化；抑菌AbstractConsumerhavebeeninterestedinnaturalpreservative，andpaidgreatattentiontofoodpreservativeforlotsoffoodsaflyproblemsinthepastfewyears．ThepurposeofexperimentistosearchforakindofnaturalandsafefoodpreservativewhichCanbeusedinpreserv

6、ationofchilled疗eshpork．LactoperoxidaseSystem(LPS)isoneofnaturalantibacterialactivitysysteminfreshmillqthatmeetthedemandofnaturalandsafIy．Atthesametime，theyieldofmilkserumasby-producthasincreasedalongwiththedevelopmentofchinadah-yindustryandincreaseofcheeseyield,SOrawmateria

7、lofLPproductionisplentiful．Inaddition，chilledporkhasbeenthemainwayofproduction，circulationandmarketingofporkalongwiththeimprovementoflivingcondition．SochilledporktreatedwithLPSsatisfysthedemandofmarketandisinconformi锣withthetendencyoffuture，filrthernlore，theapplicationofLPo

8、nchilledfreshporkisfeasibleintheory．Consideringtheantibacterialpropertiesandgenera