人乳寡糖的分离纯化及其结构解析

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1、寸亂各；义考］ｆ乂四＾ＯＣｈＡＮＬＪＮＩＶｔ；ＲＳＦＣＩＮＡＩＴＹＯＨ硕±学位论文：ＭＡＳＴＥＲＤＫＳＥＲＴＡＴＩＯＮ论文题目＝人乳寡糖的分离纯化及其结构解析ＳｅａｒａｔｉｏｎａｎｄＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎａｌｓｉｓｏｆＨｕｍａｎ？？■丄＂ｎｐｙ央文题目：ＭｉｌｋＯｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ作者：刘世龙指导教师；于广利教授学位类别：全日制学术学位—专业名栋：药物化学硏究方向：海洋药物化学’．＇－口而＞：—－￣—一分山—成助狂ｙ盛挺站谨｜＾（此论文献

2、给我敬爱的导师于广利教授和所有关心与帮助过我的人们。刘世龙人郭寡糖的分离纯化及其结构解析学位论文完成日期：兴＾指导教师签字；答辩委员会成员签字：為後心父］Ｉ独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作及取得的，论文中不包含其研巧成果，除。据我所知了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得或其他教育机构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。（学位论文作者签名；占签字曰期；７年０＿０（含

3、含月＾＾，化《＾／（学位论女版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研巧所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：女化导师签字；１■签字曰期：瓜年？月叫旧签字曰期；公皆年ｆ月巧ｋ人乳喜糖的

4、分离纯化及其结构解析人設寡搪的分离纯化及其结构解析摘要人乳寡糖（ＨＭＯｓ有益生、抗病毒和促进婴儿大脑发育等多种生物活性，）然而人乳寡糖的合成瓶颈限制了人乳寡糖构效关系的研究，这就凸畳了分离纯化天然人乳寡糖的重要性。本文Ｗ人乳为原料，经离必脱脂、除蛋白后获得ＨＭ化粗提取物，粗品得率为Ｗｇ／Ｌ，其总糖含量为９２．５％（Ｗ／Ｗ，蛋白含量）为３．７％Ｗ／Ｗ。首次联合运用低压凝胶渗透色谱（）、高效离子交换色谱、多孔石８墨化碳色谱分离纯化技术分离获得了１８个中性人乳寡糖和个酸性人乳寡糖组－－分，并运用电喷雾碰撞诱导串験质谱技术（ＥＳＩ

5、ＣＩＤＭＳ／Ｍ＾对其进行结构解析。一￣９结果表明，获得的寡糖聚合度为３，且同聚合度的寡糖有连接方式不同的异构体。在得到的１８种天然中性人乳寡糖中，兰糖异构体有２种，四糖异构体有２种，五糖异构体有３种，六糖异构体有２种，七糖异构体有２种，八糖异构体有４种，九糖异构体有２种：在得到的８种天然酸性人乳寡糖中，Ｈ糖异构体２种，五糖异构体２种，六糖异构体２种，七糖和八糖各１种。这些寡糖二、Ｇａ－－－主链的元结构核屯单元ｌ５１４Ｇｌｃ和Ｇａｌ９１３ＧｌｃＮＡｃ或Ｇａｌ？ｌ４ＧｌｃＮＡｃ，且／ｙｙ二ａ－－－还原端元结构为Ｇｌ９１４Ｇｌｃ，二元

6、？１３或１６连接，Ｆｕｃ可ｙ各结构之间通过／公连接在Ｇａｌ的Ｃ２位、Ｇｌｃ的Ｃ３位、ＧｌｃＮＡｃ的Ｃ３或Ｃ４位：Ｎｅｕ５Ａｃ连接在ＧｌｃＮＡｃ的Ｃ６位、Ｇａｌ的Ｃ３或Ｃ６位上。本文首次利用多维色谱技术将结构复杂的人现寡糖进行分离，获得了包括２６－－不同异构体在内的种天然人乳寡糖，并采用先进的ＥＳＩＣＩＤＭＳ／ＭＳ技术确定了它们的结构序列，克服了非衍生寡糖异构体分离度较低Ｗ及寡糖异构体结构一。确定难的问题，为进步从事人乳寡糖构校关系的研究奠定了方法学参考关键词：人乳寡糖；石墨化碳色谱；分离纯化；电喷霉碰撞诱导串联质谱；结构解析１

7、人乳真糖的分离纯化及其结构解析ＳｅａｒａｔｉｏｎａｎｄＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎａｌｓｉｓｏｆＨｕｍａｎＭｉｌｋｐｙＯｌｉｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｇＡｂｓｔｒａｃｔＨｕｍａｎｍｉ化ｏｌｉｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓＨＭＯｓｌａｉｍｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｓｉｎｍａｎｂｉｏｌｏｉｃａｌｒｏｃｅ巧ｅｓｇ（）ｐｙｐｙｇｐｉｎｃｌｕｄｉｎｇｂｅｎｅ行ｃｉａｉｅｆｅｃｔｏｆｉｎ化ｓｔｉｎａｌｂａｃ化ｒｉａ，ａｎｔｉｖｉｒａｌａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｐｏｓｔｎａｔａｌｂｒａｉｎｄｅｖｅ－ｌｏｍｅｎｅｔｃ．