nf-κb、tnf-α和小胶质细胞在无创肢体缺血后处理脑保护中的作用

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1、中图分类号R614UDC610硕士学位论文学校代码密级10533公开NF．KB、TNF．仅和小胶质细胞在无创肢体缺血后处理脑保护中的作用RolesofNF-vd3、TNF一0candmicrogliainneuroprotectioninducedbynoninvasivelimbremoteischemiapostconditioninginMCAOrats作者姓名：学科专业：研究方向：莫雪莹临床医学麻醉学学院(系、所)：湘雅医院指导教师：副指导教师程智刚副教授杨胜辉主治医师论文答辩日期2塑!

2、：』、，厂答辩委员会主席中南大学二O一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中彳、=包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：茗席芬v日期：赳年』月』学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有

3、关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中同学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。日期：鲨堕年且竺日NF．KB、TNF．u和小胶质细胞在无创肢体缺血后处理脑保护中的作用摘要目的本实验在建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型基础上，研究NF．v．B、TNF．0【和小胶质细胞在无创性远端肢体缺血后处理脑保护机制中的作用。方法健康雄性SD大鼠，体重2

4、50-3009，随机分为3组(eachn=15)：假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I／R组)和无创远端缺血后处理组(NRIPoC组)。I／R组参照Longa制作MCAO模型方法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型，阻断大鼠右侧大脑中动脉90rain后施行再灌注。Sham组除不插入栓线外，其他手术操作步骤同I／R组。NRIPoC组建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型方法同I／R组，在大脑中动脉再灌注后立即行右侧下肢加压缺血5min／再灌注5min共3次循环后持续恢复右下肢血流。I／R组和NR／PoC组于

5、大脑中动脉再灌注后24h，Sham组于手术完成后24h分别对各组大鼠进行神经功能障碍评分，评分后处死大鼠，进行TTC染色测定脑梗死容积；HE染色及Nissl染色分别观察缺血半影区脑组织细胞形态及神经细胞存活情况。采用Ibal标记小胶质细胞，免疫组化法观察小胶质细胞形态和数量的变化。免疫组化和Westernblot法测定NF—KB、TNF—a的表达。结果1．大鼠脑缺血再灌注24h后，NRIPoC组脑梗死容积比I／R组脑梗死容积显著减小俨<0．05o2．HE染色和Nissl染色：HE染色显示I／R组

6、和NRIPoC组腑缺血中心区均出现细胞坏死，脑缺血半影区神经细胞数目减少，体积减小，核固缩，染色质浓缩、边聚。而NRIPoC组细胞损伤程度较I／R组减轻。NRIPoC组尼氏体数量较I／R组显著增)3n(P<0．05)。3．缺血半影区NF—r,B和TNF—C【表达：与Sham组相比，I／R组和NRIPoC组缺血半影区NF．v．B和TNF．仅表达免疫组化法及Westernblot法均显著升高(P

7、与Sham组相比，I／R组和NRIPoC组小胶质细胞数目显著增加俨<0．05)。NRIPoC组小胶质细胞数日比I／R组增加(P<0．05)。5．脑缺血再灌注24h后，NRIPoC组神经功能障碍评分中位数较I／R组下降，但I／R组和NRIPoC组神经功能障碍评分差异无统计学意义(P>0．05)。结论1．无创性远端肢体缺血后处理的脑保护机制可能与降低NF—l(B和TNF．0【表达，减轻脑内炎症反应有关。2．小胶质细胞可能参与无创性肢体远端缺血后处理过程，其作用有待进一步研究。关键词：脑保护；缺血再灌

8、注损伤；缺血后处理；小胶质细胞；核因子一rd3；肿瘤坏死因子．双分类号：R614IIIRolesofNF．v．B、TNF．仅andmicrogliainneuroprotectioninducedbynoninvasiveABSTRACT1imbremoteischemicpostconditioninginMCAOratsObjective：ThisstudyaimstoinvestigatewhetherNF-r,B，n虾一Qandmicrogliainvolveinthecerebralp