β-榄香烯对宫颈癌细胞株hela体外放射增敏及作用机制的研究

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1、同等学力人员硕士学位论文论文题目β-榄香烯对宫颈癌细胞株HeLa体外放射增敏及作用机制的研究研究生姓名周晔指导教师姓名余进进专业名称妇产科学研究方向妇科肿瘤论文提交日期2013年10月β-榄香烯对宫颈癌细胞株HeLa体外放射增敏及作用机制的研究中文摘要β-榄香烯对宫颈癌细胞株HeLa体外放射增敏及作用机制的研究中文摘要放射治疗是宫颈癌治疗的主要手段之一。由于肿瘤细胞的生物学特性及局部微环境等因素的影响往往致放射治疗疗效不尽如人意，因此，寻找有效的宫颈癌放射增敏剂具有重要的临床意义。近年来，人们发现某些中药具

2、有放射增敏效应。榄香烯是从姜科植物温莪术中提取的非细胞毒性抗肿瘤药，具有广谱抗肿瘤作用，毒副作用小，能提高肿瘤放射增敏效应。过去对榄香烯抗癌作用机制的研究仅限于榄香烯对肿瘤细胞增殖、分化和凋亡、免疫原性等的影响，关于其作用靶点研究很少报道。本研究选用低细胞毒性的β-榄香烯作用于宫颈癌HeLa细胞，观察β-榄香烯对HeLa细胞体外放射增敏作用，初步探讨放射增敏作用靶点，为β-榄香烯放射增敏剂临床应用提供理论依据。目的：研究β-榄香烯对人宫颈癌HeLa细胞株放射敏感性的影响，探讨其作用与CDK1、cyclinB

3、1、bcl-2及P53表达的关系。方法：本实验采用人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象，实验组用含不同浓度(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml、320μg/ml)β-榄香烯RPMI-1640培养液进行培养，在不同照射剂量（2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy）下直线加速器6MV-X线照射，采用MTT法测定不同浓度β-榄香烯对HeLa细胞的生长抑制率；克隆形成率观察β-榄香烯对HeLa细胞的放射增敏作用；荧光定量RT-PCR法检测不同剂量β-榄香烯（30μg/ml

4、、45μg/ml）作用24h、48h后CDK1、cyclinB1、bcl-2及P53的表达情况。结果：1、β-榄香烯作用HeLa细胞24h的半数抑制浓度(IC50)为112.6μg/ml，β-榄香烯对HeLa细胞有显著抑制作用，随着药物浓度的增大，细胞的抑制率逐渐增高(p<0.05)。2、低细胞毒浓度的β-榄香烯（30μg/ml）对HeLa细胞进行放射敏感性实验，结I中文摘要β-榄香烯对宫颈癌细胞株HeLa体外放射增敏及作用机制的研究果提示：相同剂量下，30μg/mlβ-榄香烯联合放疗组A570nm值均较单

5、纯放疗组降低。统计学分析组间有显著性差异(P<0.05)。初步判断β-榄香烯对HeLa细胞有放射增敏作用。3、不同剂量β-榄香烯（30μg/ml和45μg/ml）作用HeLa细胞24h后细胞克隆数及存活率的检测，结果显示：30μg/ml、45μg/mlβ-榄香烯作用24h后联合上述照射剂量放疗组较单纯放疗组细胞克隆数明显下降，统计学分析各组间有显著性差异(P<0.05)；且30μg/ml、45μg/ml两浓度组之间亦有显著性差异(p<0.05)。因此，克隆形成率进一步证明β-榄香烯在低细胞毒性浓度下对HeL

6、a细胞有放射增敏作用，且随药物浓度逐渐增加，放射增敏作用逐渐增强。4、30μg/ml与45μg/mlβ-榄香烯乳作用24h、48h后，荧光定量PCR法测定CDK1、CyclinB1、bcl-2及p53的表达。结果显示，β-榄香烯单独作用HeLa细胞后，可下调细胞周期分子CDK1、CyclinB1，下调细胞凋亡分子bcl-2以及上调p53的表达。结论：1.β-榄香烯乳对Hela细胞的增殖有明显的抑制作用，其IC50值、IC20值、IC10值分别为112.6μg/ml、45.34μg/ml、29.56μg/ml

7、，其抑制作用与剂量呈正相关性。2.β-榄香烯乳在低细胞毒性剂量下对Hela细胞有放射增敏作用，并随剂量的增加而增强，其增敏作用与剂量呈正相关性。3.β-榄香烯作用Hela细胞，可下调CyclinB1、bcl-2及上调p53的表达。由此推测其放射增敏机制可能是通过细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡作用从而起到放射增敏的作用。详细机制有待于进一步的实验研究证实。关键词：宫颈癌β-榄香烯放射敏感性CDK1CyclinB1bcl-2p53作者：周晔指导教师：余进进IIβ-榄香烯对宫颈癌细胞株HeLa体外放射增敏及作用机制的

8、研究英文摘要AStudyonRadiosensitivityofβ-elemenetoCervicalcancerofHeLaCellLineinvitroAbstractRadiotherapyisaveryimportantwaytotreatthecervicalcancer.Buttheresultofradiotherapyisnotsatisfactorybecauseofthebiologicalf