猪皮胶原蛋白的提取及其与壳聚糖共混性能研究

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1、摘要本文利用胃蛋白酶在酸性条件下从猪皮中提取胶原蛋白，并研究不同去乙酰度壳聚糖与胶原蛋白共混样品的性能。采用正十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对胶原蛋白样品进行分析，并估算其相对分子质量。利用紫外可见分析对所提取胶原蛋白定性分析。用傅立叶红外(FrIR)胶原蛋白，示差量热扫描仪(DSC)，乌氏(Ubbelohde)黏度计对聚糖与胶原蛋白共混样品的相容性，生物活性进行了详细的探讨。并参照AATCC方法对共混样品的抑菌性能进行探讨，并讨论壳聚糖不同去乙酰度及浓度对抑菌率的影响。电泳结果证明，所提取的胶原

2、蛋白为I型具有完整的生物活性的胶原蛋白，并估算其相对分子质量为320kD。特性粘度测试表明，壳聚糖溶液的h】m值随壳聚糖去乙酰度的增加而逐渐增加，四种去乙酰度壳聚糖溶液的h】m均明显比胶原蛋白溶液的【11】m大，而且壳聚糖／胶原蛋白共混溶液的hlm值随着壳聚糖含量的增加而增加。而根据不同去乙酰度的壳聚糖／胶原蛋白共混溶液的b12值均明显大于bd，则可说明胶原蛋白与壳聚糖具有相容性。胶原蛋白与不同去乙酰度的壳聚糖共混之后，FFIR分析表明，胶原蛋白的变性程度随壳聚糖含量的增加而增加，即生物活性随壳聚糖含量增加而降低。DSC分析

3、表明，胶原蛋白／壳聚糖共混样品的变性温度(TD)随其内壳聚糖含量由0％逐渐增加到20％时先降低，之后随壳聚糖含量增加至40％时其TD值陡然升高至较对应纯壳聚糖分子之变性温度更高之数值；但当壳聚糖含量大于40％时，随着壳聚糖含量增加，其TD值反而明显下降然后再逐步上升至接近壳聚糖分子之变性温度。抑茵性能研究表明，壳聚糖溶液的最小有效抑菌浓度是0．03wt％，且壳聚糖的浓度和乙酰度越高，对金黄色葡萄球菌的抑菌效果越好。而壳聚糖／月交原蛋白共混溶液的抑菌率随着壳聚糖含量的增加而增加，相同壳聚糖浓度下，抑菌率随着壳聚糖去乙酰度增加而

4、增加。关键词：猪皮胶原蛋白壳聚糖去乙酰度相容性生物活性抑菌性AbstractInthisstudy，collagenwasextractfromthepigskinusingacidswelling-pepsinmethod．Varyingcompositionsofchitosan／collagenspecimenswerepreparedbyblendingcollagenandchitosanmoleculeswithvaryingdegreesofdeacetylationinsolutions．Themiscibl

5、e，antibacterialandbioactivepropertiesofcollagen／chitosanblendswereinvestigatedbyintrinsicviscositymeasurements，antibacterialactivityanalysis，TranseforminfraredSpectroscopy(FTIR)anddifferentScanningCalorimetry(DSC)analysisrespectively．Theinfluencesofdifferentdegrees

6、ofdeacetylationonthemiscible，antibacterialandbioactivepropertiesofchitosan／collagenspecimensarereportedinthisstudy．Possiblereasonsaccountingfortheinterestingpropertiesofchitosan／collagenspecimensobservedinthisstudyareproposed．SDS-PAGEanalysisresultedinal，a2，Bl，B2an

7、d7fivetypicallinessuggestedthattheextractionproductistypeIcollagen，andtheevaluatedmoleculemasswasabout320kD．TheUVanalysissuggestedtheUVfeaturesoftheextractionproductaccordedwiththatofcollagen．The【11】mvaluesofchitosansolutionsincreasedsignificantlywithincreasingthei

8、rdeacetylationdegrees．Itwasinterestingtonotethattheh】mvaluesofthechitosansolutionsweresignificantlyhigherthanthoseofthecollagensolutions．Moreover